[发明专利]具有壳聚糖‑RGD复合涂层的种植体活性表面的制备方法

权利要求书

1.具有壳聚糖-RGD复合涂层的种植体活性表面的制备方法，其特征在于：包括以下操作步骤：

(1)先秤取100mg RGD加至10ml的浓度为1％的醋酸-醋酸钠缓冲液中；缓慢搅拌至溶解后，加入EDC·HCl 500mg，再加入NHS 250mg，经过磁力搅拌器活化12h；放入ddH₂O中透析，在磁力搅拌器搅拌状态下隔夜；获得RGD肽溶液；

(2)将种植体表面打磨，清洗，烘干；用50～100μmTiO₂微粒对种植体表面进行喷砂处理；再置于氢氟酸与盐酸组成的混合酸蚀剂中进行表面刻蚀处理，取出种植体超声清洗，干燥；再将种植体置于60℃、5mol/L NaOH溶液孵育24-48h，用水超声清洗备用；

(3)将步骤(2)所述的牙种植体浸没于0.5～5mg/ml的壳聚糖溶液中10～20min，以使牙种植体表面带上正电荷；再用去离子水充分清洗；

(4)将步骤(3)所述的牙种植体浸没于步骤(1)所述的RGD肽溶液中3h以上；或浸没于浓度为lmg/ml的AMP复合物溶液中5～10min，以使牙种植体表面带上负电荷；再用去离子水充分清洗；

根据需要组装的层数，重复步骤(3)、(4)和(3)即可得到带有不同层数涂层的牙种植体；

(5)将步骤(4)所述的牙种植体在浓度为2mg/mL的硫酸软骨素硫酸钠盐溶液中浸泡5～15min，溶液体系控制pH值为6，再用去离子水充分清洗后自然干燥；再将涂覆有硫酸软骨素的牙种植体浸泡于pH值为7，浓度为0.5mg/mL的抗菌肽溶液中5～15min，再用去离子水充分清洗后自然干燥，获得涂覆有硫酸软骨素层-抗菌肽层复合层的材料。

2.根据权利要求1所述的具有壳聚糖-RGD复合涂层的种植体活性表面的制备方法，其特征在于：所述的清洗是指去离子水，乙醇和丙酮超声清洗，用氮气吹干后，放于真空干燥箱中，在60℃的条件下干燥24小时。

3.根据权利要求1所述的具有壳聚糖-RGD复合涂层的种植体活性表面的制备方法，其特征在于：所述的壳聚糖的脱乙酰度为50～98％，Mw为100～1500kDa。

4.根据权利要求1所述的具有壳聚糖-RGD复合涂层的种植体活性表面的制备方法，其特征在于：所述的壳聚糖溶液为将壳聚糖溶解在0.3～3％的乙酸溶液中，配成0.5～5mg/ml的壳聚糖溶液，将所得溶液与液体石蜡混合，体积比为0.1～0.4，并加入体积浓度为0.5～1％的司盘80，同时加入分散剂硬脂酸镁，司盘80与硬脂酸镁的质量比为2～4∶1，搅拌所得油包水乳液，向其中加入5～10mg/ml的交联剂香草醛1ml，40℃～60℃搅拌状态下反应4～6小时后；静置取上清液；再将所得的壳聚糖微粒以水悬浮，添加少量的冰醋酸溶液，磁力搅拌器搅拌条件下，再加入NaCl，使其终浓度达到0.15M；该溶液带正电荷。

5.根据权利要求4所述的具有壳聚糖-RGD复合涂层的种植体活性表面的制备方法，其特征在于：所述静置取上清液是指，静置12小时以上分离油水相，取下层水溶液，调节pH值为8～9，离心除去沉淀物，取上清液得到壳聚糖微粒悬浮液。

6.根据权利要求1所述的具有壳聚糖-RGD复合涂层的种植体活性表面的制备方法，其特征在于：所述浓度为lmg/ml的AMP复合物溶液的配置方法为：秤取50mg AMP复合物粉末加至50ml的灭菌后去离子水中，搅拌充分至完全溶解，加冰醋酸调pH为5.0，此溶液带有正电荷。