[发明专利]一种萝芙木快速增殖培养基及其应用

说明书

技术领域

本发明属于通过组织培养技术的植物再生领域，具体涉及到一种萝芙木快速增殖培养基及其应用。

背景技术

萝芙木：直立常绿灌木，高可达3m，具乳汁，属于一种药材，功能主治镇静，降压，活血止痛，清热解毒。用于高血压病，头痛，眩晕，失眠，高热不退，外用治跌打损伤，毒蛇咬伤等。萝芙木根中分离出利血平、阿吗碱、萝莱碱、蛇根亭碱、阿吗灵、山马蹄碱、萝芙木甲素、锥洛斯明碱、霹雳萝芙辛碱、一种单萜类生物碱等多种生物碱，含量为1～2％，其中利血平具有良好的降压作用。萝芙木中尚含熊果酸0.2％，熊果酸的抗肿瘤作用广泛，极有可能成为低毒有效的新型抗癌药物。因此，萝芙木具有很高的药用价值，而且萝芙木的种植也已经得到国家的推广。

由于连年的采挖，资源急剧减少，从20世纪80年代中期开始，生产厂家就把药用部位由根扩展到全株，而且为保护野生资源，满足企业生产需求，越来越多的研究机构开展了萝芙木规范化种植研究。

萝芙木的繁殖主要是种子与扦插繁殖，但是种子繁殖发芽率低，生长速度慢，周期长等缺点，而扦插繁殖操作复杂，成活率低等缺点而不能广泛推广，因此，为了促进萝芙木快速繁殖，对萝芙木组织进行了培养基的研究，摆脱了外部环境对植株的影响，而且可以对优良的品种进行筛选，对品种进行优化，因此，植物培养基对萝芙木的快速繁殖十分重要。

《红果萝芙木植物组织培养及快速繁殖》，张丽珍，等，江苏农业科学出版社，2015年第43卷第6期公开了红果萝芙木不同时期的培养基，以红果萝芙木茎段为外植体，研究其再生条件，结果表明：丛生芽诱导培养基为MS+1.0mg/L 6－BA+0.05mg/L IBA；继代增殖、壮苗培养基分别为MS+0.3～0.5mg/L 6－BA+0.02mg/L IBA、MS+0.1～0.2mg/L 6-BA+0.01mg/L IBA；根分化的最适培养基为1/2MS+0.5mg/L NAA+0.2mg/L IBA。

公开号为101731149A的中国专利申请公开了一种利用组织培养技术快速繁殖云南萝芙木的方法，该发明以萝芙木嫩枝带芽茎段作外植体，接种在启动培养基上诱导腋芽产生，启动培养基组成为MS+2.0-4.0mg/LBA+0.05-0.1mg/LNAA。增殖培养MS+2.5-5.0mg/LBA+0.1-0.5mg/LNAA，增殖系数为8-12，每4-5周重复继代一次。生根培养基为添加1.0mg/LNAA或IBA或NAA+IBA＝1.0mg/L的1/2MS培养基，5-6周后将生根苗移栽到炼苗基质中，20-30℃保湿遮阴炼苗3-4周转栽或大田种植，成活率达90％。此发明方法操作简单，繁殖速度快，遗传稳定性好，为工厂化育苗提供技术支撑。

但是上述技术中增殖培养使用的是1个单位的MS培养基，铵态氮含量过高，容易伤害外植体，造成成活率低。

发明内容

为了解决现有技术的不足，本发明公开了一种萝芙木快速增殖培养基及其应用，本发明公开的培养基是在B5培养基的基础上，添加适量的植物激素，并且加入了萝芙木乳汁和蔗糖，极大地加快了萝芙木的快速增殖。

一种萝芙木快速增殖培养基，所述的增殖培养基组成为B5培养基、0.5-1mg/L 6-苄基嘌呤、0.2-0.5mg/L 2,4-二氯苯氧乙酸、0.1-0.2mg/L赤霉酸、0.5-1g维生素E、1000-1500mg/L萝芙木乳汁和30-40g/L蔗糖。

进一步的，所述的增殖培养基组成为B5培养基、0.8mg/L 6-苄基嘌呤、0.35mg/L 2,4-二氯苯氧乙酸、0.15mg/L赤霉酸、0.8g维生素E、1300mg/L萝芙木乳汁和35g/L蔗糖。