[发明专利]一种注射用赖氨匹林中赖氨酸含量的检测方法及应用

说明书

本发明提供了一种赖氨酸的高效液相色谱检测方法，能够对药品“注射用赖氨匹林”中的赖氨酸含量进行准确可靠的测定，线性范围广，系统适用性良好，准确度高，稳定性、精密度、耐用性和专属性均良好，且操作简单易行，较衍生化法和氨基酸自动分析仪检测法，大大降低了检测成本。

技术领域

本发明涉及一种赖氨酸的检测方法及应用，具体的说涉及一种通过HPLC检测药品中赖氨酸的检测方法和应用。

背景技术

药物赖氨匹林为阿司匹林和赖氨酸复盐，是非甾体抗炎解热镇痛药，具有解热、镇痛、抗炎作用。其临床应用剂型为注射用赖氨匹林。

《中国药典》2015版新增了“注射用赖氨匹林”品种，其中“含量测定”项下规定赖氨酸和阿司匹林两部分分别测定含量。但是药典中对赖氨酸的含量测定仅记载了“用适宜的氨基酸分析仪或高效液相色谱仪进行分离测定”，并未记载具体的检测条件。

目前通过高效液相色谱法(HPLC)检测氨基酸含量主要是采用衍生化法，例如以邻苯二甲醛(OPA)、2，4-二硝基氯苯(CDNB)、异硫氰酸苯酯(PITC)、2，4-二硝基氟苯(DNFB)为衍生化试剂，对氨基酸含量进行测定。但是目前已知的现有技术中的衍生化反应及色谱条件都不能适用于注射用赖氨匹林中赖氨酸的含量测定，通过现有方法检测到的衍生化物不止一个，专属性很差。

高效液相色谱法(HPLC)虽然是常用的检测分析方法，但是对于特定的被测物，需要经过大量的实验摸索，才能筛选出色谱条件中各种参数的最佳选择。尤其是在对药品赖氨匹林的检测中，因为有阿司匹林和赖氨酸两种成分，在常规反相色谱条件下出峰快，相互干扰，很难直接分离测定。

因此，开发一种赖氨酸的检测方法，能够准确、可靠的检测注射用赖氨匹林中的赖氨酸含量，作为药品质量标准，非常必要。

发明内容

本发明提供一种赖氨酸的高效液相色谱检测方法，其色谱条件为：用磺酸基阳离子交换键合硅胶为填充剂，以磷酸盐溶液和乙腈的混合液作为流动相，其中磷酸盐溶液的浓度为10-60mmol/L，乙腈的体积百分比为5-25％，检测波长为200-210nm，该检测波长为能检测氨基酸紫外吸收的末端波长。

优选的，本发明提供一种赖氨酸的高效液相色谱检测方法，其色谱条件为：用磺酸基阳离子交换键合硅胶为填充剂，以20mmol/L磷酸二氢钾-乙腈(85:15)为流动相，检测波长为205nm。

进一步的，本发明所述赖氨酸的高效液相色谱检测方法，其色谱条件为：用磺酸基阳离子交换键合硅胶为填充剂，以20mmol/L磷酸二氢钾-乙腈(85:15)为流动相，检测波长为205nm，流速为1.0ml/min，柱温为35℃。

进一步的，本发明所述赖氨酸的高效液相色谱检测方法，其理论板数按赖氨酸峰计不低于3000。

优选的，本发明所述赖氨酸的高效液相色谱检测方法，其中待检测的赖氨酸浓度范围为0.2-2.0058mg/ml。

优选的，本发明所述赖氨酸的高效液相色谱检测方法，其中待测品为药品注射用赖氨匹林。

优选的，本发明所述赖氨酸的高效液相色谱检测方法，其测定方法为：

色谱条件与系统适用性试验：用磺酸基阳离子交换键合硅胶为填充剂，以20mmol/L磷酸二氢钾-乙腈(85:15)为流动相；检测波长为205nm，理论板数按赖氨酸峰计，应不低于3000。

测定法：取注射用赖氨匹林供试品适量，精密称定，加0.02mmol/L盐酸溶液溶解并定量稀释成每1ml中约含赖氨酸0.8mg的溶液作为供试品溶液，精密量取20μl，注入液相色谱仪，记录色谱图；另取盐酸赖氨酸对照品适量，同法测定。按外标法以峰面积计算赖氨酸的含量，即得。