[发明专利]一种应用于高通量测序同时检测T细胞和B细胞免疫组库的引物组合及试剂盒

权利要求书

1.一种应用于高通量测序同时检测T细胞和B细胞免疫组库的引物组合，其特征在于：所述引物组合包括XCR 3’Oligo(dT)引物，XCR 5’Oligo接头，XCR 5’端接头引物，TCR-alpha链C区引物，TCR-beta链C区引物，BCR-Heavy链C区引物中的IgA、IgG和IgM，BCR-Light链C区引物中的Kappa和Lambda，以及标签上下游引物；每种引物序列如下：

XCR 3’Oligo(dT)引物：5’TTTTTTTTTTTTTTTTTTTTGA 3’；

XCR 5’Oligo接头：5’ATGCATCGGATCTTCAGCATGAACTTrGrGrG 3’；

XCR 5’端接头引物：

5’GTCTCGTGGGCTGGGCGATGTGTATGAGAGACAGCATGCATCGGATCTTCAGCATGA 3’；

TCR-alpha链C区引物：

5’TCGTCGCCAGCGTCGGAAGTGTATAAGAGACAGTCTCAGCTGGTACATATCGATGTCAGGGT 3’；

TCR-beta链C区引物：

5’TCGTCGCCAGCGTCGGAAGTGTATAAGAGACAGTCGCAGCGTCAGATGTGTATAAGAGACAG 3’；

BCR-Heavy链C区引物：

IgA：5’TACGCGATATCGCTCTGCGCTAACTAGTCGTACTAGGCTCCTGGGTTCCGAAGCC 3’；

IgG：5’TACGCGATATCGCTCTGCGCTAACTAGTCGTACTAGCGCCTGAGAAGGACGACAC 3’；

IgM：5’TACGCGATATCGCTCTGCGCTAACTAGTCGTACTAGGGGAATTCTTCTGGGAGAC 3’；

BCR-Light链C区引物：

Kappa:

5’TACGCGATATCGCTCTGCGCTAACTAGTCGTACTACCTTCCACTCTATATTGGCCTC 3’；

Lambda:

5’TACGCGATATCGCTCTGCGCTAACTAGTCGTACTAGCCACTGTATCCGCTCCCGGG 3’；

标签上游引物：5’CAAGCAGAAGACGGCATACGAGAT[index1]GTCTCGTGGGCTGG 3’；

标签TCR下游引物：5’AATGATACGGCGACCACCGAGATCTACAC[index2]TCGTCGCCAGCGTC 3’；

标签BCR下游引物：5’AATGATACGGCGACCACCGAGATCTACAC[index3]TACGCGATATCGCT 3’。

2.根据权利要求1所述的一种应用于高通量测序同时检测T细胞和B细胞免疫组库的引物组合，其特征在于：所述index1为ATCTATCG、TCAGGTGA、CACTAGTT、GAATTGCC、ATGTACAA、GATTCAGT、CTGTTCGT或TATACGGC中的一种；index2为TAGCTACT、ATTATAGC、CCCGTACT、GGGTATAA、AGCAGGTG、TATACGTA、CACCTAGT或GTTGCTAC中的一种；

index3为TAATCGCT、ATATTACC、CCTATACT、GGATGAAA、AGTCTTTG、TAGTGGTA、CACGATGT或GTATGAAC中的一种。

3.一种应用于高通量测序同时检测T细胞和B细胞免疫组库的试剂盒，其特征在于：所述试剂盒包含有如权利要求1或2所述的引物组合。

4.根据权利要求3所述的一种应用于高通量测序同时检测T细胞和B细胞免疫组库的试剂盒，其特征在于：所述试剂盒还包括PCR缓冲液、Q5 High-Fidelity 2X Master Mix、去核酸酶水、AMPure XP Beads和70％乙醇。