[发明专利]一种阿魏菇液体菌种野外接种阿魏植物的方法

权利要求书

1.一种阿魏菇液体菌种野外接种阿魏植物的方法，其特征在于，由以下步骤构成：

步骤1：预培养阿魏菇菌丝体并对杂菌检测；

步骤2：将预培养好的菌丝体接种至灭菌处理的木屑培养基上，22℃～26℃暗培养，待菌丝长满即为液体专用种，对其进行质量检测；所述的检测方法为：在无菌条件下，取液体专用种接种至PDA培养基平板，22℃～26℃暗培养2d～5d，观察是否污染细菌或真菌，选取没有污染的液体专用种制备菌丝体悬浮液并进行质量检测；所述菌丝体悬浮液制备包括用接种棒将液体专用种捣碎，接种至盛有00ml～800mlPD加富培养基的1000ml三角瓶中，于摇床上培养，摇床设定转速180rpm～240rpm，温度为22℃～26℃，待专用种菌丝体长成和小米粒大小小菌丝球后对其进行质量检测；所述的检测方法为：在无菌条件下，吸取80µl～150µl菌丝体悬浮液接种至PDA培养基平板，25℃暗培养2d～5d，观察是否污染细菌或真菌，选取没有污染的菌丝体悬浮液于4℃保存备用；

步骤3：将菌丝体悬浮液用清水稀释3倍～5倍，混匀后即为待用的液体菌种；

步骤4：阿魏菇液体菌种野外接种阿魏植物：选择没有阿魏菇菌丝定植的阿魏植物，将阿魏根基部土壤用铁铲刨开，深度5cm～15cm，在不破坏阿魏根基部的腐根的情况下露出阿魏根基部，取80ml～120ml阿魏菇液体菌种均匀浇灌到阿魏根基部根组织上，然后将刨开的土壤全部回填至阿魏根基部，轻压覆土，第二年春季和秋季用工具将阿魏根基部一侧的土壤刨开，在不伤及阿魏根基部组织情况下清理干净露出阿魏根，观察和记录阿魏根基部阿魏菇菌丝的定植和生长情况。

2.如权利要求1所述的一种阿魏菇液体菌种野外接种阿魏植物的方法，其特征在于，所述的阿魏菇菌丝体预培养包括从保藏箱中取出阿魏菇菌种，接种至PDA培养基平板上活化7d～15d，用接种针挑取0.5cm²～1cm²大小的菌饼接种至高压蒸汽灭菌的PD液体培养基液面，保持菌饼的菌丝侧朝上，然后置于22℃～26℃暗培养，待菌饼菌丝完全展开后放入摇床培养3d～7d，摇床设定转速180rpm～240rpm，温度为22℃～26℃；所述的杂菌检测方法为：在无菌条件下，吸取80µl～150µl菌丝体悬浮液接种至PDA培养基平板，用杀过菌的三角棒涂匀，于22℃～26℃暗培养2d～5d，观察培养基平板是否有杂菌。

3.如权利要求2所述的一种阿魏菇液体菌种野外接种阿魏植物的方法，其特征在于，菌饼取表层菌丝层。

4.如权利要求2所述的一种阿魏菇液体菌种野外接种阿魏植物的方法，其特征在于，所述PD液体培养基是指80ml～120mlPD加富液体培养基盛放在250mL三角瓶中，三角瓶内提前放入10～20颗已灭菌的玻璃球。