[发明专利]自然杀伤细胞的体外纯化方法

权利要求书

1.一种自然杀伤细胞的体外纯化方法，其特征在于，包括如下步骤：

提供CD3抗体溶液；

将所述CD3抗体溶液承装在临床级培养容器内，充分反应后得到表面包被有CD3抗体的临床级培养容器，所述临床级培养容器为培养表面未组织处理过的T175细胞培养瓶，所述反应的时间为8h～24h，所述反应的温度为2℃～8℃；

将待纯化的自然杀伤细胞混合培养物承装在所述包被有CD3抗体的临床级培养容器内，在常规培养条件下培养2h～4h后收集所述包被有CD3抗体的临床级培养容器内的上清液；以及

对所述上清液进行离心并保留细胞沉淀，洗涤所述细胞沉淀得到纯化后的自然杀伤细胞。

2.根据权利要求1所述的自然杀伤细胞的体外纯化方法，其特征在于，所述CD3抗体溶液的溶质为CD3单克隆抗体或CD3多克隆抗体；

所述CD3抗体溶液的浓度为100ng/mL～400ng/mL。

3.根据权利要求1或2所述的自然杀伤细胞的体外纯化方法，其特征在于，所述CD3抗体溶液的溶剂为PBS缓冲液或浓度为0.9g/100mL的NaCl溶液。

4.根据权利要求1所述的自然杀伤细胞的体外纯化方法，其特征在于，所述常规培养条件的温度为37℃、5％CO₂。

5.根据权利要求1所述的自然杀伤细胞的体外纯化方法，其特征在于，所述对所述上清液进行离心并保留细胞沉淀的操作中，所述离心的转速为600rpm～1000rpm，所述离心的时间为5min～10min。

6.根据权利要求1所述的自然杀伤细胞的体外纯化方法，其特征在于，所述洗涤所述细胞沉淀的操作为：采用浓度为0.9g/100mL的NaCl溶液重悬所述细胞沉淀，接着600rpm～1000rpm离心5min～10min，保留洗涤干净的细胞沉淀。