[发明专利]一种活性益生菌冻干粉及其制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及生物技术中的微生物学科领域，具体涉及一种活性益生菌冻干粉，同时涉及其制备方法。

背景技术

随着人们生活水平的提高，对健康的要求越来越高，益生菌普遍的被接受并广泛使用。益生菌是一类对宿主有益的活性微生物，是定植于人体肠道、生殖系统内，能产生确切健康功效从而改善宿主微生态平衡、发挥有益作用的活性有益微生物的总称。益生菌的概念在1989年被提出，2002年科学家确定益生菌的概念和疗效。之后短短十年世界人类卫生领域发生了巨大的变化，益生菌益生元的研究和产品开发成为了潮流。该领域的研发、生产，目前在乳酸菌、双歧杆菌的研究和应用方面尤其突出。这方面的产品有传统的酸奶，以及新开发的各种酸奶，乳酸饮料，各种单复合菌保健品、食品，还有用于治疗肠道疾病的益生菌制剂。因为益生菌的保存条件苛刻，现有产品普遍存在着活菌易死亡，菌数不稳定，导致益生菌产品保质期短，质量不稳定的技术问题。

发明内容

为了解决现有技术发酵活菌数太少、发酵时间太长，产品周期过长的技术问题，本发明提供了一种菌种培养条件不苛刻，发酵性能稳定，发酵过程设备投资小，而且培养基简单，便宜，易获得，用量很少，几乎不产生废料且活菌数稳定的益生菌饮料配方。

本发明的提供的活性益生菌冻干粉由以下制备方法制备而成：

1）培养基制备

培养基材料准备：

20g葡萄糖、10g蛋白胨、10g牛肉膏、5g酵母膏，加少量热水完全溶解，备用；

乳酸菌培养基增效剂准备：

称取柠檬酸氢二铵2g 、无水硫酸镁 0.58g、硫酸锰 0.25g、Tween-80 1mL、无水乙酸钠 5g、磷酸氢二钾2g，混合，备用；

培养用水：自来水经直饮机超滤后无菌水；

将乳酸菌培养基增效剂加入到培养基材料中搅拌溶解，将培养基移入1L的锥形瓶中加入培养用水至1L，0.1 MPa， 121℃灭菌30min，然后冷却至室温备用；

2）菌种活化培养

将植物乳杆菌、嗜酸乳杆菌、干酪乳杆菌和乳双歧杆菌四个菌种分别接种到四个斜面MRS培养基上，在培养箱中37℃，24小时，得到扩大培养所需的菌种；

3）扩大培养

用步骤1）制备好的冷却至室温的培养基，在无菌条件下等量接种四个菌种，摇匀后放置于培养箱中，37℃，静止发酵24小时；

4） 生产发酵

制备发酵培养基，转入100L的发酵罐中，以体积1%的量接扩大培养后的菌种，搅拌均匀，控制发酵温度37℃，16-24小时，pH降到4.1-4.5，即可终止发酵；

所述发酵培养基的材料及配比为：糖蜜1.74份、酵母膏1.26份、大豆蛋白胨0.6份；

5）沉淀过滤

步骤4)制备的发酵液，在静止沉淀的状态下，吸取上清液，弃置沉淀渣滓，上清液用550目的过滤器，过滤，得到透明、澄清的最后乳酸饮料；

6）用低温真空冷冻干燥机冻干制得冻干粉。

以上四种菌的冻干粉经稀释至原发酵液浓度时，活菌总含量不低于9.21×10⁹cfu/ml。

本发明采用上述技术解决方案所能达到的有益效果是：

1、本发明设计了一个含有植物乳杆菌、嗜酸乳杆菌、干酪乳杆菌和乳双歧杆菌四个菌株的保健饮料配方，并设计了一套制作工艺，以三级静态深层液体发酵、每级发酵16-24小时，发酵温度37℃，最后一级发酵所得菌液经沉淀过滤即可包装成产品，该加工工艺操作简便。生产的产品为冻干粉，略有发酵味，PH为4.1-4.5，保质期不低于两年，此冻干粉经稀释至原发酵液浓度时，保质期内活菌总数不低于9.21×10⁹cfu/ml；

2、本发明选择的四个菌种，培养条件要求不苛刻，培养温度比较温和，且能有效繁殖；发酵性能稳定，在扩大培养的菌液中能连续10个月持续发酵产酸，其性能都没有明显衰减、活菌数没有明显的降低；

3、生产用培养基，简单、便宜、容易获得，有部分培养基甚至是工业废料的在利用，用量很少，几乎没有废料产生；

4、发酵过称采用发酵罐、深层、静止发酵、不需要搅拌，此工艺过程特点，使得过程设备投资较小，无需增加电机等动力搅拌装置，能在室温下保存两年，而同类产品却要求2-6℃低温条件保存，且保质期仅为一年半；

5、本发明中的三级发酵，每级发酵时间为16-24小时，相比于目前存在的多数乳酸菌发酵时间大大降低，缩短了产品周期。

具体实施方式