[发明专利]用高效液相色谱法测定盐酸屈他维林注射液中有关物质的方法

权利要求书

1.一种用高效液相色谱法测定盐酸屈他维林注射液中有关物质的方法，其特征在于，该方法包括如下步骤：

(1)配制供试样品溶液：

取盐酸屈他维林注射液用溶剂配制成供试样品溶液；

(2)配制对照品溶液：

取盐酸屈他维林、乙基罂粟碱和屈他维林酮用溶剂配制成对照品溶液；

(3)配制系统适用性溶液：

取盐酸屈他维林、乙基罂粟碱和屈他维林酮用溶剂配制成系统适用性溶液；

(4)进行系统适用性实验；

(5)进行检测灵敏度实验；

用对照品溶液调节高效液相色谱仪的检测灵敏度，使主成分色谱峰的峰高为满量程的10-25％；

(6)按照下列高效液相色谱条件进行测定：

流动相：以磷酸盐缓冲液作为流动相A，以乙腈为流动相B，以甲醇为流动相C；所述磷酸盐缓冲液为0.1％磷酸水溶液用三乙胺调节至pH＝3.3±0.05；

紫外检测器：检测波长为200-400nm；

色谱柱：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；

流速：0.5-2.0mL/min；

柱温：20-60℃；

(7)按外标法，计算有关物质的含量；

以流动相A、流动相B和流动相C进行梯度洗脱；所述的梯度为：

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的紫外检测器的检测波长为200-300nm。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的紫外检测器的检测波长为244nm。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述流速为1.0mL/min；所述柱温为30-50℃。

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述柱温为40℃。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述供试样品溶液的配制具体包括配制含盐酸屈他维林0.8mg/mL的溶液，所述溶液的溶剂为流动相A、甲醇和乙腈形成的混合溶剂，所述混合溶剂为将甲醇和乙腈按体积比2:1混合后的混合液再与流动相A按体积比1:9混合。

7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述对照品溶液的配制具体包括配制含盐酸屈他维林、乙基罂粟碱和屈他维林酮的溶液，所述溶液中盐酸屈他维林的浓度为4.0μg/mL；乙基罂粟碱的浓度为1.6μg/mL；屈他维林酮的浓度为4.0μg/mL；将盐酸屈他维林、乙基罂粟碱和屈他维林酮先用甲醇与乙腈体积比为2:1的混合液溶解，然后加入流动相A、甲醇和乙腈形成的混合溶剂，所述混合溶剂为将甲醇和乙腈按体积比2:1混合后的混合液再与流动相A按体积比1:9混合。

8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述系统适用性溶液的配制具体包括配制含盐酸屈他维林、乙基罂粟碱和屈他维林酮的溶液，所述溶液中盐酸屈他维林的浓度为0.8mg/mL；乙基罂粟碱的浓度为1.6μg/mL；屈他维林酮的浓度为4.0μg/mL；将盐酸屈他维林、乙基罂粟碱和屈他维林酮先用甲醇与乙腈体积比为2:1的混合液溶解，然后加入流动相A、甲醇和乙腈形成的混合溶剂，所述混合溶剂为将甲醇和乙腈按体积比2:1混合后的混合液再与流动相A按体积比1:9混合。

9.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述系统适用性试验是指取系统适用性溶液20μL注入液相色谱仪，盐酸屈他维林与乙基罂粟碱的分离度大于3.0，各杂质峰之间分离度符合要求，理论塔板数按盐酸屈他维林计算，不低于3000。