[发明专利]一种抗肿瘤活性的鲜冬虫夏草提取物及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种具有抗肿瘤活性的鲜冬虫夏草提取物，其特征在于，鲜冬虫夏草提取物中多糖含量为69.4～76.7％，蛋白含量为10.2～14.3％；所述多糖包含3种分子量大于1KDa的多糖，重均分子量分别为1422KDa，29KDa和2.7KDa；所述蛋白的分子量分布范围主要存在于10～15KDa和20～37KDa处；所述的具有抗肿瘤活性的鲜冬虫夏草提取物的制备方法包括以下步骤：

a、将鲜冬虫夏草破碎，加水匀浆，粉碎，控制温度为15～25℃；

b、将匀浆后的鲜冬虫夏草进行超声提取，控制温度为15～25℃，离心得上清液，然后将鲜冬虫夏草残渣于-20℃冷冻静置；

c、将冷冻的鲜冬虫夏草残渣取出，加水匀浆并分散均匀，再次超声提取，控制温度为15～25℃，然后离心，得上清液，合并步骤b的上清液；

d、往离心后的上清液中加无水乙醇至浓度为60～80％后，在4℃下静置过夜；于4℃下冷冻离心，收集沉淀；

e、将沉淀进行冷冻干燥，得鲜冬虫夏草提取物。

2.一种权利要求1所述的具有抗肿瘤活性的鲜冬虫夏草提取物的制备方法，所述制备方法包括以下步骤：

a、将鲜冬虫夏草破碎，加水匀浆，粉碎，控制温度为15～25℃；

b、将匀浆后的鲜冬虫夏草进行超声提取，控制温度为15～25℃，离心得上清液，然后将鲜冬虫夏草残渣于-20℃冷冻静置；

c、将冷冻的鲜冬虫夏草残渣取出，加水匀浆并分散均匀，再次超声提取，控制温度为15～25℃，然后离心，得上清液，合并步骤b的上清液；

d、往离心后的上清液中加无水乙醇至浓度为60～80％后，在4℃下静置过夜；于4℃下冷冻离心，收集沉淀；

e、将沉淀进行冷冻干燥，得鲜冬虫夏草提取物。

3.根据权利要求2所述的具有抗肿瘤活性的鲜冬虫夏草提取物的制备方法，其中，在步骤a中，所述的鲜冬虫夏草和水的重量体积比为1:8～12g/mL，匀浆时间为4～8min，匀浆转速为14000～18000rpm。

4.根据权利要求2所述的具有抗肿瘤活性的鲜冬虫夏草提取物的制备方法，其中，在步骤b中，超声提取时间为20～40min，超声功率为400～600W，离心时间为10～15min，离心转速为8000～10000rpm，冷冻静置时间为20～60min。

5.根据权利要求2所述的具有抗肿瘤活性的鲜冬虫夏草提取物的制备方法，其中，在步骤c中，所述的鲜冬虫夏草残渣和水的重量体积比为1:8～12g/mL，再次匀浆时间为4～8min，匀浆转速为14000～18000rpm，再次超声提取时间为20～40min，超声功率为400～600W，离心时间为10～15min，离心转速为8000～10000rpm。

6.根据权利要求2所述的具有抗肿瘤活性的鲜冬虫夏草提取物的制备方法，其中，在步骤d中，冷冻离心的时间为15～25min，离心的转速为8000～10000rpm。

7.根据权利要求2所述的具有抗肿瘤活性的鲜冬虫夏草提取物的制备方法，所述制备方法包括以下步骤：

a、将鲜冬虫夏草破碎，按鲜冬虫夏草与水的重量体积比加入1:10g/mL的水，匀浆6min，匀浆转速为16000rpm，粉碎，控制温度为20±2℃，将鲜冬虫夏草粉碎成细小颗粒的混悬液；

b、将匀浆后的鲜冬虫夏草进行超声提取30min，控制温度为20±2℃，功率为400～600W，离心12min，转速为9000rmp，得上清液，然后将鲜冬虫夏草残渣于-20℃冷冻静置40min；

c、将冷冻的鲜冬虫夏草残渣取出，加入重量体积比为1:10g/mL的水，匀浆6min，匀浆转速为16000rpm，并分散均匀，再次超声提取30min，控制温度为20±2℃，功率为400～600W，然后离心12min，离心的转速为9000rpm，得上清液，合并步骤b的上清液；

d、往离心后的上清液中加无水乙醇至浓度为60～80％后，在4℃下静置过夜；于4℃下冷冻离心20min，离心转速为10000rpm，收集沉淀；

e、将沉淀进行冷冻干燥，得鲜冬虫夏草提取物。