[发明专利]一种卤素取代V‑型吡啶‑2,6‑双苯并咪唑锌配合物合成方法及抗肿瘤活性检测

权利要求书

1.一种卤素取代V-型吡啶-2，6-双苯并咪唑锌配合物合成方法，包括配体合成方法和配合物合成方法，其特征在于：所述配体合成方法为：

(1)Cl-bbp配体的合成：在三颈瓶中称取多聚磷酸(10g)，再称取2，6-吡啶二甲酸(3mmol，0.5g)，4-氯邻苯二胺(6mmol，0.8555g)混合均匀后倒入三颈瓶中，在氮气保护下180℃，反应5h；反应结束后趁热倒入1L冰水中强力搅拌，完全溶解后加氨水调pH为9-11后抽滤，将滤渣洗至中性，晾干后得粗产品，用甲醇重结晶，产率：73％；

(2)Br-bbp配体的合成：在三颈瓶中称取多聚磷酸(10g)，再称取2，6-吡啶二甲酸(3mmol，0.5g)，4-溴邻苯二胺(6mmol，1.1222g)混合均匀后倒入三颈瓶中，在氮气保护下180℃，反应5h；反应结束后趁热倒入1L冰水中强力搅拌，完全溶解后加氨水调pH为9-11后抽滤，将滤渣洗至中性，晾干后得粗产品，用乙醇重结晶，产率：78％。

所述配合物合成方法为：

(1)配合物Zn(Cl-bbp)Cl₂(1)的合成：称取ZnCl₂金属盐(0.0054g，0.04mmol)溶于4mL乙醇，加入有机配体Cl-bbp(0.0038g，0.01mmol)的乙醇溶液，混合后放入玻璃样品瓶中，在室温条件下静置，使溶剂缓慢挥发，溶液挥发法一周后得到配合物1的黄色晶体，用乙醇洗涤，空气中干燥；产率：62％(以Zn计)，红外光谱：(KBr/pellet，cm^-1)：3401m，3069m，1606m，1579s，1447s，1419s，1311s，1237s，1058m，1016w，930m，861m，815s，667m；

(2)配合物Zn(Br-bbp)Cl₂(2)的合成：用Br-bbp(0.0042g，0.01mmol)替代Cl-bbp配体，室温静置4天后，过滤，得到黄色晶体，用乙醇洗涤后，干燥；产率：56％(以Zn计)，红外光谱(KBr/pellet，cm^-1)：3435m，1627s，1605s，1578s，1478s，1447s，1385m，1312s，1237w，1157w，922m，866w。

2.根据权利要求1所述的一种卤素取代V-型吡啶-2，6-双苯并咪唑锌配合物合成方法，其特征在于：所述配体合成方法的步骤(1)中的红外光谱为：(KBr/pellet，cm^-1)：3193s，1625m，1601m，1574m，1460s，1434s，1383m，1312m，1155w，1060s，928s，736s，692m。

3.根据权利要求1所述的一种卤素取代V-型吡啶-2，6-双苯并咪唑锌配合物合成方法，其特征在于：所述配体合成方法的步骤(2)中的红外光谱为：(KBr/pellet，cm^-1)：3190s，1619m，1599s，1578s，1458s，1307s，1228m，1158w，916s，805s，682s，654m，590m。

4.根据权利要求1所述的一种卤素取代V-型吡啶-2，6-双苯并咪唑锌配合物抗肿瘤活性检测，包括肿瘤细胞培养方法和MTT法测细胞抗肿瘤活性检测方法，其特征在于：

(1)所述肿瘤细胞培养方法为：将HCT116，BGC823细胞分别接种于盛有DMEM培养液(含体积比为10％的血清和1％双抗)的培养皿中，放置于37℃细胞培养箱(含5％CO₂和95％的空气)中孵育，每次实验取处于对数期的细胞；

(2)所述MTT法测细胞抗肿瘤活性检测方法为：使用MTT(3-(4，5-二甲基噻唑-2)-2，5-二苯基四氮唑溴盐)法分别对配合物1和2的抗肿瘤活性检测进行测试，实验前，配合物1-2分别用DMSO助溶，然后用培养液稀释，终溶液中的DMSO含量不超过3‰；将细胞HCT116，BGC823分别接种到96孔板上，每孔200μL，细胞数目控制在(5×10³-6.5×10³个/孔)；生长24h后，移除旧的培养液并将含有不同浓度配合物1或2的培养液分别加入到相应的96孔板中，配合物的浓度梯度为5-50μM，每个浓度设置5个复孔。孵育相应的时间段后，每孔中加入MTT溶液(5mg/mL)20μL，并于培养箱中继续孵育4小时；取出96孔板并轻轻吸去孔内的液体，然后每孔分别加入150μL DMSO溶液，室温下在摇床上震荡5-10min，待结晶物完全溶解后，用酶标仪在492nm处检测每个孔的OD值；计算抑制率：抑制率(％)＝(A_对照-A_实验)/A_对照×100，抗肿瘤活性结果用IC₅₀值表示，IC₅₀值为对细胞增殖达到50％抑制效果时的药物浓度，根据抑制率计算得到。