[发明专利]一种高含量4-甲基硫氧丁基硫甙白菜类作物的选育方法有效
申请号: | 201611224588.4 | 申请日: | 2016-12-27 |
公开(公告)号: | CN106591355B | 公开(公告)日: | 2020-05-22 |
发明(设计)人: | 王晓武;梁建丽;武剑;程峰;刘志远;张冀芳 | 申请(专利权)人: | 中国农业科学院蔬菜花卉研究所 |
主分类号: | C12N15/82 | 分类号: | C12N15/82;A01H5/00;A01H6/20 |
代理公司: | 北京聿宏知识产权代理有限公司 11372 | 代理人: | 吴大建 |
地址: | 100081 北京市海淀区*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 含量 甲基 丁基 白菜 作物 选育 方法 | ||
1.一种高含量4-甲基硫氧丁基硫甙白菜类作物的选育方法,其包括:
步骤A,将供体材料R-O-18中丧失功能的基因导入待育种的受体材料L58中,获得聚合单株;
步骤B,对聚合单株进行系统选育,获得高含量4-甲基硫氧丁基硫甙白菜类作物;
其中,所述丧失功能的基因为BrAOP2.2和BrAOP2.3;
其中,通过聚合杂交将供体材料R-O-18中丧失功能的基因导入待育种的受体材料L58中,并通过分子标记辅助选择法筛选聚合单株;
利用分子标记辅助选择法筛选聚合单株的具体方式为:
首先根据丧失功能的BrAOP2.2和BrAOP2.3基因与功能正常基因之间的序列差异分别设计KASP和InDel分子标记,此标记在丧失功能的基因的植株和功能正常基因的植株中有明显的区别;
然后提取待筛植株的DNA,利用设计的分子标记进行PCR扩增,检测PCR扩增产物;若PCR扩增产物中的标记与丧失功能的基因的标记符合,则表明待筛植株中含有丧失功能的基因,挑选含有相应丧失功能的基因的植株既可获得聚合单株;
其中KASP标记引物分别为:
Hex荧光引物:5’-GAAGGTCGGAGTCAACGGATTGTGGTGCTGAATACTTCATCAGTCA-3’;
FAM荧光引物:5’-GAAGGTGACCAAGTTCATGCTGGTGCTGAATACTTCATCAGTCG-3’;
通用引物:5’-AGAACCTCAAGTCAATGAATTACCGTCTA-3’);
InDel标记的引物为:
上游引物F:5’-GTGCTGGTGATGGTGCTAATGATG-3’;
下游引物R:5’-CAACACCAGCACTACTGAGAGTAC-3’。
2.根据权利要求1所述的选育方法,其特征在于,所述高含量4-甲基硫氧丁基硫甙白菜类作物中含有丧失功能的蛋白,所述丧失功能的蛋白为BrAOP2.2 和BrAOP2.3。
3.根据权利要求1或2所述的选育方法,其特征在于,所述系统选育的代数为2-4代。
4.根据权利要求1或2所述的选育方法,其特征在于,所述高含量4-甲基硫氧丁基硫甙白菜类作物中的4-甲基硫氧丁基硫甙的含量是普通白菜类作物中的4-甲基硫氧丁基硫甙含量的5-10倍。
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