[发明专利]一种液相色谱高分辨质谱测定土壤中草甘膦残留量的方法

说明书

本发明公开了一种液相色谱高分辨质谱测定土壤中草甘膦残留量的方法，包括以下步骤：1)土壤样品中草甘膦残留量的氢氧化钾提取；2)样品提取液的分散固相萃取净化；3)使用液相色谱—高分辨质谱仪检测；4)结果分析：包括定性和定量分析。本发明用氢氧化钾提取土壤中的草甘膦残留，用二氯甲烷除去土壤中的有机物，用CAX小柱净化；用液相色谱‑高分辨质谱对土壤样品中草甘膦的精确质量数进行的定性和定量分析，不仅可以消除其他非目标化合物的干扰，还进一步提高了草甘膦定性的准确性和定量的可靠性。

技术领域

本发明涉及农业生产技术领域，具体是涉及一种液相色谱高分辨质谱测定土壤中草甘膦残留量的方法。

背景技术

土壤是自然生态环境的一个重要组成部分，更是一个复杂的多介质载体，同时也是除草剂的重要归属。草甘膦化学名为N-膦羟甲基甘氨酸，因为其高效、低毒等优点，成为广泛使用的除草剂之一，自推向市场以来，广泛的用于各种杂草的防除，非农田杂草的治理；草甘膦在环境和生物体内不断富集，通过食品和饮用水进入体内，对人体造成伤害；绿色和平组织的分析报告也提出：广泛使用除草剂草甘膦是不安全的，对生殖健康、癌症和神经系统都有影响。因此对土壤中或其他介质中草甘膦残留量的检测、管理就显得格外的重要。

目前土壤中草甘膦的检测方法一般有高效液相色谱柱前柱后衍生法、气相色谱法、液质联用法、气质联用法，相对于气相色谱，液相色谱更适用于分析高沸点、大分子、强极性和热稳定性差的化合物，但由于草甘膦缺少必要的官能团，因此样品检测需要前处理以及柱前、柱后衍生，操作较为繁琐。周艳明等采用水提取、柱前衍生、液相色谱荧光检测器检测水中的草甘膦，近年来，检测器的不断改进，提高了检测的灵敏度和效率.Kusters等采用阳离子交换柱富集草甘膦，然后进行液相色谱测定。到90年代大量采用的气相色谱和气相色谱-质谱方法(GC-MS)，这两种方法使得草甘膦的检测灵敏度较之液相色谱高了很多。也有人用用水浸提出香蕉中的草甘膦(PMG)和代谢产物AMPA，利用阳离子交换固相萃取(SPE)小柱净化处理后在三氟乙酸酐和七氟丁醇的混合液中进行衍生化；随后用GC-MS定性定量。高效液相色谱－质谱联用技术(high performance liquid chromatography-massspetrometry HPLC-MS)是一种利用内喷射式和粒子流式接口技术将液相色谱与质谱联接起来的检测方法，原理与气相色谱－质谱联用技术相似。随着近年来液相色谱-质谱联用技术的出现和进一步发展，高分辨质谱在原有HPLC-MS的基础上增加了高分辨模式，对草甘膦的结构式的分析能力有了进一步的提高，并且高分辨质谱则对草甘膦的分析检测更灵敏、更准确，提高了草甘膦定性和定量的可靠性。

由于草甘膦没有紫外吸收又不易挥发，采用气相色谱或高效液相色谱检测，往往借助于柱前衍生化处理，测定步骤较为复杂；更重要的是土壤中草甘膦残留量检测的前处理过程较为复杂，工作量大、时间长。寻找一种快速、简便、高效的检测分析方法迫在眉睫。

发明内容

本发明是针对现有技术对土壤中的草甘膦残留量的测定方法太复杂、工作量大、时间长，准确度和灵敏度不高的问题，提供了一种液相色谱高分辨质谱测定土壤中草甘膦残留量的方法。

本发明的技术方案是：

一种液相色谱高分辨质谱测定土壤中草甘膦残留量的方法，包括以下步骤：

1)土壤样品中草甘膦残留量的氢氧化钾提取

称取5.0g土壤样品至于塑料离心管中，加入20ml浓度20％氢氧化钾，进行振荡离心处理，提取液用50ml二氯甲烷萃取两次，5000r/min离心5min，收集水层待净化。

2)样品提取液的分散固相萃取净化