[发明专利]一种杂交不育黄姑鱼的生产方法

说明书

本发明公开了一种杂交不育黄姑鱼的生产方法，分别以箕作黄姑鱼为母本，银姑鱼为父本，促进其性腺同步成熟；挑选性腺发育良好的箕作黄姑鱼和银姑鱼亲鱼，注射用促黄体素释放激素A2对箕作黄姑鱼进行人工催产；采集箕作黄姑鱼卵子和银姑鱼精子，进行干法受精；杂交仔、稚、幼鱼培育和性腺观察。采用杂交的方法培育性腺不育的黄姑鱼，培育出的黄姑鱼具有成活率高、抗逆性强、完全不育等特点，该方法具有简单易行的优点，杂交不育的黄姑鱼在养殖生产中具有较好的推广应用前景，而且可以作为人工“代孕”的受体，具有非常重要的应用价值。

技术领域

本发明涉渔业技术领域，具体说是利用人工杂交的方法产生不育黄姑鱼的方法,尤其是涉及一种杂交不育黄姑鱼的生产方法。

背景技术

性腺不育的鱼类在水产养殖中具有较高的科研和应用价值。首先，性腺不育的鱼类往往表现出生长快、出肉率高等优势；其次，性腺不育的鱼类能够降低因鱼类逃逸到自然界带来的生态风险；再者，性腺不育的鱼类在科研中具有特别的应用，如在鱼类人工“代孕”研究中，性腺不育的鱼类作为受体产生其他鱼种的精子或卵子。因此，探索产生性腺不育鱼类的方法在水产养殖中具有重要意义。

通常，可以通过人工杂交、三倍体诱导、基因敲除（降）等方法产生性腺不育的鱼类。其中，人工杂交作为经典的育种方法之一，由于操作简便而受到研究者的普遍重视。人工杂交是利用不同种间、属间或科间的鱼种进行杂交产生后代。人工杂交成功与否、后代是否能够成活或不育，取决于用于杂交的父母本遗传物质的相容性，杂交的结果往往很难预测。因此，获得完全不育的杂交后代需要大量的试验筛选、验证。我们通过箕作黄姑鱼(Nibea mitsukurii)、黄姑鱼(Nibea albiflora)、银姑鱼 (Pennahia argentata)、日本黄姑鱼(Argyrosomus japonicus)、大黄鱼(Larimichthys crocea)、小黄鱼(Larimichthys polyactis)等进行多个组合的杂交试验，筛选出箕作黄姑鱼和银姑鱼的杂交组合，杂交后代能够完全不育，在养殖生产中具有较好的应用前景，而且能够作为人工“代孕”的受体，具有较高的科研应用价值。

发明内容

本发明的目的是提供一种具有便于现场操作、安全可靠、简单易行，成活率高、抗逆性强、完全不育的利用人工杂交的方法产生性腺不育黄姑鱼的方法。

本发明实现其发明目的所采用的技术方案是：一种杂交不育黄姑鱼的生产方法，该方法包括以下步骤：

（1）亲鱼的培育

选择箕作黄姑鱼雌鱼和银姑鱼雄鱼作为亲鱼，分别对箕作黄姑鱼和银姑鱼进行营养强化和光温调控，促进其性腺同步成熟；培育时采用升温培育，水温由18℃逐渐升到24℃；在亲鱼培育池中挑选性腺发育较好的亲本，挑选后的亲本置于黑布遮住桶中，保持培育水温为22—24℃；

（2）雌性箕作黄姑鱼的人工催产

对雌性箕作黄姑鱼进行催产，选用注射用促黄体素释放激素A2作为催产剂，注射剂量为1kg亲本注射1.5—2μg催产素，亲本的培育温度为24℃时催产效应时间为28—32h；对箕作黄姑鱼采用人工挤压腹部法采卵；

（3）人工采集银姑鱼精液

采用人工挤压腹部法采集银姑鱼精液，用经消毒的干燥玻璃滴管吸取干净精液，用经消毒的干燥玻璃滴管吸取干净精液，保存于1.5 mL离心管中，置于冰上；

（4）箕作黄姑鱼♀×银姑鱼♂人工杂交