[发明专利]一种毒素Tx4(6-1)无标签重组蛋白的生产方法有效
| 申请号： | 201611239694.X | 申请日： | 2016-12-28 |
| 公开（公告）号： | CN106754945B | 公开（公告）日： | 2021-03-30 |
| 发明（设计）人： | 李洪波;蒋鹰;夏玉先 | 申请（专利权）人： | 怀化学院 |
| 主分类号： | C12N15/12 | 分类号： | C12N15/12;C12N15/70;C12N1/21;C07K14/435;C12R1/19 |
| 代理公司： | 北京中政联科专利代理事务所(普通合伙) 11489 | 代理人： | 秦佩 |
| 地址： | 418000 湖*** | 国省代码： | 湖南;43 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 毒素 tx4 标签 重组 蛋白 生产 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种重组载体，其特征在于，所述重组载体具体为将核苷酸如序列1所示的基因插入表达载体中，得到表达如序列2所示蛋白的重组载体，所述表达载体为pET32载体。
2.由权利要求1所述重组载体构建的重组菌，其特征在于，所述重组菌为将权利要求1所述重组载体导入大肠杆菌中。
3.一种制备蛋白的方法，其特征在于，将权利要求2所述的重组菌在LB培养基中培养表达。
4.根据权利要求3所述的制备蛋白的方法，其特征在于：方法还包括纯化蛋白的步骤：将表达得到的融合蛋白用肠激酶切割，再利用截留分子量为10kDa的透析袋在pH值为6.5～6.6的5～10mM Tris-HCl透析缓冲液中透析，将透析后所得的透析缓冲液，利用阳离子柱吸附后用10～30mM NaCl溶液漂洗，再用100～150mM NaCl洗脱，即可得高纯度的Tx4(6-1)重组蛋白。
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