[发明专利]一种紫玉兰组织培养工艺

说明书

技术领域

本发明涉及植物组织培养技术领域，尤其涉及一种紫玉兰组织培养工艺。

背景技术

紫玉兰又名木兰、辛夷，为中国特有植物，分布在中国云南、福建、湖北、四川等地，生长于海拔300米至1600米的地区，一般生长在山坡林缘；紫玉兰花朵艳丽怡人，芳香淡雅，孤植或丛植都很美观，树形婀娜，枝繁花茂，是优良的庭园、街道绿化植物，为中国有2000多年历史的传统花卉和中药；且不易移植和养护，是非常珍贵的花木。

现在随着技术的发展，很多地区都在开展紫玉兰培养的方法，想在本地区培育种植紫玉兰；传统的紫玉兰一般采用播种、扦插、嫁接、压条和分株繁殖等培养方式；这些培养方式的耗时长，而且繁育不易成活；现有的一些紫玉兰组织培养方式是在封闭的无菌条件下进行的，所需成本较大，而且还存在着组织培养中外植体容易褐化，成活率不高的问题，不能用于紫玉兰的大量繁殖。

申请号为201310730707.3的专利文件公开了一种紫玉兰组织培养方法，用于提供一种在开放式条件下进行，不用置备一个封闭式无菌环境，节约了成本；对紫玉兰灭菌处理，保证了外植体无菌污染，提高其培养成活率高；用2％PVP浸泡外植体以及在培养基中加入2％PVP，减轻了外植体的褐化，提高了外植体的成活率的紫玉兰组织培养方法；该紫玉兰组织培养方法操作简单，时间短，成本低廉，成活率高、生根率高，并能实现短期内的出瓶移栽，且能够保持原品种的优良性状，为良种繁育和产业化生产奠定基础；但是，其不能够大幅度提高紫玉兰组织培养的生根率和成活率，且不能够提高组织培养的紫玉兰的质量。

因此，我们提出了一种紫玉兰组织培养工艺用于解决上述问题。

发明内容

基于背景技术存在的技术问题，本发明提出了一种紫玉兰组织培养工艺。

本发明提出的一种紫玉兰组织培养工艺，包括以下步骤：

S1：对进行紫玉兰组织培养的场地做灭菌抑菌处理；

S2：在生长健壮、无病虫害的紫玉兰母本植株上选择直径为1-3cm带有腋芽的紫玉兰枝条作为外植体；

S3：将外植体先用自来水冲洗10-12min，然后用浓度为0.1-0.3％的升汞和吐温混合物浸泡8-12min，最后用无菌水冲洗4-7min；

S4：准备以下重量份的原料：乙醇20-25份，吲哚丁酸钾21-24份，滑石粉15-20份，黏土12-16份，萘乙酸钠25-30份，草木灰18-22份，火土灰17-21份，然后将乙醇、吲哚丁酸钾、滑石粉、黏土、萘乙酸钠、草木灰和火土灰混合，制得试剂；

S5：将无菌水冲洗后的外植体浸入试剂内，浸泡5-8h；

S6：将浸泡后的外植体插入基本培养基中进行培养，至新芽长出后，将长出新芽的外植体转插入伸长培养基中进行新芽的伸长培养，至新芽伸长到0.3-0.5cm后，将外植体接入含有生长调节物质的基本培养基中，培养20-25天后，将外植体在5-8℃下冷藏12-16天，然后转接到基本培养基中继续培养25-30天，生根后将生根苗移接到室外进行培养。

优选地，所述S2中，在生长健壮、无病虫害的紫玉兰母本植株上选择直径为2-3cm带有腋芽的紫玉兰枝条作为外植体。

优选地，所述S3中，将外植体先用自来水冲洗11-12min，然后用浓度为0.2-0.3％的升汞和吐温混合物浸泡9-11min，最后用无菌水冲洗5-6min。

优选地，所述S4中，准备以下重量份的原料：乙醇21-24份，吲哚丁酸钾22-23份，滑石粉16-19份，黏土13-15份，萘乙酸钠26-29份，草木灰19-21份，火土灰18-20份，然后将乙醇、吲哚丁酸钾、滑石粉、黏土、萘乙酸钠、草木灰和火土灰混合，制得试剂。

优选地，所述S5中，将无菌水冲洗后的外植体浸入试剂内，浸泡6-7h。

优选地，所述S6中，将浸泡后的外植体插入基本培养基中进行培养，至新芽长出后，将长出新芽的外植体转插入伸长培养基中进行新芽的伸长培养，至新芽伸长到0.4-0.5cm后，将外植体接入含有生长调节物质的基本培养基中，培养21-24天后，将外植体在6-7℃下冷藏13-15天，然后转接到基本培养基中继续培养26-29天，生根后将生根苗移接到室外进行培养。