[发明专利]一种大黄蛰虫丸的指纹图谱检测方法

权利要求书

1.一种大黄蛰虫丸的指纹图谱检测方法，其特征在于，所述指纹图谱检测方法，包括以下步骤：

(1)供试品溶液制备：取大黄蛰虫丸粉末，精密称定，置圆底烧瓶中，精密加入甲醇或乙醇，称定重量，超声提取，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，离心取上清液，用0.22μm微孔滤膜过滤取滤液，制成供试品溶液；

(2)对照品溶液的制备：精密称取芍药苷、芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚、毛蕊花糖苷对照品，用甲醇或乙醇溶解，分别配置成适宜浓度的对照品储备液；

(3)高效液相色谱法测定本品的对照指纹图谱：取5～10批大黄蛰虫丸供试品在适当的色谱条件下进样，测得各批次供试品的指纹图谱，以这些指纹图谱为基础，用相似度软件计算获得共有模式作为本品的对照指纹图谱；

(4)取对照品溶液按步骤(3)相同的色谱条件进样，测得各对照品溶液的高效液相图谱；

(5)高效液相色谱法测定供试品溶液指纹图谱：取步骤(1)供试品溶液按步骤(3)相同的色谱条件进样，测得供试品溶液的指纹图谱；并根据步骤(4)所得对照品溶液的高效液相图谱归属各色谱峰；

(6)将步骤(5)得到的供试品溶液指纹图谱和步骤(3)得到的对照指纹图谱用相似度软件评价。

2.根据权利要求1所述的大黄蛰虫丸的指纹图谱检测方法，其特征在于，步骤(3)色谱柱：Thermo C18色谱柱(规格)流动相：A相甲醇-B相0.1％甲酸水溶液，梯度洗脱；流速1.0ml/min；检测波长270nm；柱温：30℃；进样量10μL。

3.根据权利要求3所述的大黄蛰虫丸的指纹图谱检测方法，其特征在于，

步骤(3)梯度洗脱程序如下表：

4.根据权利要求1至3任一项所述的大黄蛰虫丸的指纹图谱检测方法，其特征在于，步骤(1)中供试品溶液制备方法为：取大黄蛰虫丸粉末1g，精密称定，置圆底烧瓶中，精密加入甲醇25mL，称定重量，超声提取40min，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，离心取上清液，用0.22μm微孔滤膜过滤取滤液，制成供试品溶液。

5.根据权利要求4所述的大黄蛰虫丸的指纹图谱检测方法，其特征在于，步骤(2)对照品溶液的制备：精密称取芍药苷、芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚和毛蕊花糖苷对照品各2g，用甲醇溶解，分别配置成1mg/mL的对照品储备液。