[发明专利]一种PCR荧光检测仪有效
申请号: | 201611245178.8 | 申请日: | 2016-12-29 |
公开(公告)号: | CN106635785B | 公开(公告)日: | 2019-04-19 |
发明(设计)人: | 戴立忠;章洪建;邓中平;唐景年;杨勇 | 申请(专利权)人: | 湖南圣湘生物科技有限公司 |
主分类号: | C12M1/38 | 分类号: | C12M1/38;C12M1/34 |
代理公司: | 北京弘权知识产权代理事务所(普通合伙) 11363 | 代理人: | 逯长明;许伟群 |
地址: | 410205 湖南省长*** | 国省代码: | 湖南;43 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 通孔 温差 加热板 底端 扩增 加热 对流 低温区域 高温区域 检测仪 液面处 液面 检测 | ||
本发明提供一种PCR荧光检测仪,在该检测仪中,将PCR反应管放置于第一通孔、第二通孔和第三通孔内,使PCR反应管底端位于第三通孔处,PCR反应管中PCR反应液的液面位于第一通孔处,实现95℃加热板对PCR反应管底端加热,60℃加热板对PCR反应管中PCR反应液液面处加热,进而PCR反应管的上下端产生温差。温差使得PCR反应管中的PCR反应液由底部高温区域流向顶部低温区域,形成对流。由于温差以及对流,DNA能够在PCR荧光检测仪中不断扩增,不需要为达到DNA扩增不同阶段所需的温度而不断升温、降温,因此,本发明提供的PCR荧光检测仪能够节省扩增时间,进而缩短PCR检测仪的检测时间。
技术领域
本发明涉及检测装置技术领域,尤其涉及一种PCR荧光检测仪。
背景技术
PCR(Polymerase Chain Reaction,聚合酶链式反应)技术是一种在生物体外放大扩增特定DNA(deoxyribonucleic acid,脱氧核糖核酸)序列的分子生物学技术。PCR技术具有特异性强、灵敏度高、纯度要求低以及简便、快速的特点,因而被广泛应用于分子生物学检测及分析。
一般的,PCR技术扩增DNA的过程为:在合适的缓冲溶液及耐热DNA聚合酶的混合体系中,DNA在大约95℃的温度下发生高温解链反应,即DNA双链间的氢键断裂,形成2条互补的单链DNA;单链DNA在具有方向性和特异性的寡核苷酸链作为引物介导下发生退火(复性)反应,即将单链DNA的温度迅速降至引物的设计温度值(一般大约为50-65℃)的范围内,单链DNA与引物遵循碱基互补配对原则结合;迅速将温度再升高到72℃左右,单链DNA与引物结合后发生延伸反应,DNA聚合酶自引物3’端开始结合脱氧核苷三磷酸,根据模板上的相应碱基,以互补配对原则顺次延伸,从而形成一条新的与模板互补的DNA片段。经过PCR技术扩增后,初始DNA分子数量增加一倍,是为一个循环;倍增后的DNA分子继而成为下一个循环的模板,如此下去,经过30-40个循环之后,DNA分子数目将放大至初始值的近109倍。
目前,现有的PCR检测仪能够同时对多个PCR反应管中的PCR反应液扩增。在PCR检测仪扩增DNA时,样品孔内放置已盛装PCR反应液的PCR反应管,卤钨灯作为照射光源。卤钨灯发出的灯光通过五色光源滤光片后照射到每个PCR反应管上,每个PCR反应液中的荧光分子受到卤钨灯灯光的激发会产生荧光,荧光通过五色荧光滤光片后到达CCD(Charge-coupled Device,电荷耦合元件)相机,由CCD相机将荧光信号转换为电信号,进而判断PCR扩增DNA后的产物总量。由于每个PCR反应管到卤钨灯的距离不同,越靠近卤钨灯中心的PCR反应管,其内部的荧光分子就越容易受到激发,荧光就越强,而远离卤钨灯中心的PCR反应管,其内部的荧光分子的荧光就越弱,因而同一次PCR扩增DNA后的荧光检测存在差异。另外,在PCR检测仪扩增DNA过程中,需要不断迅速升温、降温,而升温、降温的时间较长,这大大延长一个扩增循环的时间,进而降低扩增效率。
发明内容
本发明提供一种PCR荧光检测仪,以解决现有PCR检测仪检测时间较长的问题。
本发明提供一种PCR荧光检测仪,所述检测仪包括电路装置以及设置在所述电路装置上表面上的光路装置;
所述光路装置的内部具有中空内腔,所述光路装置的顶部具有与所述中空内腔相连通的第一通孔;
所述光路装置的顶部设置有60℃加热板,所述60℃加热板的中心设置有第二通孔;
所述中空内腔中设置有95℃加热板,所述95℃加热板的中心设置有第三通孔;
所述第一通孔、所述第二通孔和所述第三通孔的中心在同一直线上。
优选地,所述电路装置包括检测电路板、光发射器和光接收器,所述光发射器与所述光接收器设置在所述检测电路板上,且所述光发射器与所述检测电路板中心之间的连线垂直于所述光接收器与所述检测电路板中心之间的连线。
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