[发明专利]一种以子叶节为外植体的红椿再生方法在审
申请号: | 201611247903.5 | 申请日: | 2016-12-29 |
公开(公告)号: | CN106577299A | 公开(公告)日: | 2017-04-26 |
发明(设计)人: | 李培;陈晓阳;张俊杰;李俊成;周玮;李青粉 | 申请(专利权)人: | 华南农业大学 |
主分类号: | A01H4/00 | 分类号: | A01H4/00 |
代理公司: | 广州科粤专利商标代理有限公司44001 | 代理人: | 刘明星 |
地址: | 510630 广*** | 国省代码: | 广东;44 |
权利要求书: | 查看更多 | 说明书: | 查看更多 |
摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 子叶 外植体 再生 方法 | ||
技术领域
本发明属于植物组织培养技术领域,具体涉及一种以子叶节为外植体的红椿再生方法。
背景技术
红椿(Toona ciliata Roem.)隶属楝科(Meliaceae)香椿属(Toona),分布范围主要包括中国、印度、老挝、缅甸、巴基斯坦,此外,澳大利亚东海岸也有分布。在我国的分布区域主要集中在华南、华中、华东及西南地区。红椿材质优良,花纹美丽,是上等的家具用材,以“中国桃花心木”的美誉远销海外。它具有早期速生性状明显、生长快等特点,生长量均超过一般人工栽培的常绿阔叶树种,在我国南方地区已成为重点开发利用的优质速生用材树种。红椿天然群体多数以零星分布的形式存在,由于环境的变化、天然更新能力较差及过度的采伐破坏,红椿目前已成为濒危树种,为国家Ⅱ级重点保护野生植物。除广泛应用在家具设计、车船制造及室内装饰领域外,红椿因其树形美观,也可以作为行道树栽种,近年来在药用方面的应用也得到较大的发展。
目前红椿繁殖方式多采用种子繁殖。但其成年大树树形通直,使得采种较为困难,且该树种的种子较小,千粒重仅4.4g,因此严重影响了其长期的保存能力,因此,红椿扦插、嫁接及组织培养等繁殖技术得到越来越多的关注。扦插及嫁接繁殖对红椿的嫩枝要求较高,采穗圃的构建同样需要大量人力物力。在短时间内,传统的种子繁殖和扦插繁殖不能及时满足种苗市场需求,此时,可通过组织培养技术解决种苗快速且大量繁殖问题。
红椿组织培养技术的研究报道较少,主要集中在利用成年大树带芽茎段构建组培体系,但所获得的腋芽诱导率均较低,增殖情况并不理想,且生根培养并不成功。
发明内容
本发明的目的是提供一种以红椿子叶节为外植体的操作更简便、取材更广泛的高效的红椿再生方法,利用该方法能够在短期内快速获得大量优质的红椿种苗。本发明以红椿子叶节为材料,快速获得健康的不定芽,增殖获得大量的再生幼苗,旨在解决子叶节的再生问题,提高红椿再生能力,为工厂化生产种苗、种质资源保护研究提供有效的参考价值。
本发明的以子叶节为外植体的红椿再生方法,其特征在于,包括以下步骤:
A、外植体的获得:将红椿种子去掉双侧翅,在水中浸泡3~5h,经消毒后将种子播种于固体MS培养基上培养得到无菌苗,切取无菌苗的子叶节作为外植体;培养条件为温度25±2℃,光照强度2500lx,光照时间12h/d;
B、不定芽的诱导:将子叶节接种到芽诱导培养基上培养诱导不定芽,培养条件为温度25±2℃,光照强度2500lx,光照时间12h/d;
所述的芽诱导培养基:每升含有6-BA 0.6~1.0mg、KT 0.6~1.8mg、NAA 0.05~0.1mg、蔗糖30g和琼脂5g,余量为MS培养基,pH5.8~6.0;
C、生根培养:待不定芽伸长到5~8cm时,切取不定芽,接种于生根培养基上培养诱导生根,得到生根苗;培养条件为温度25±2℃,光照强度2500lx,光照时间12h/d;
所述的生根培养基:每升含有NAA0.05~0.2mg、蔗糖15g和琼脂5g,余量为MS培养基,pH5.8~6.0;
D、炼苗及移栽:将生根苗炼苗后从培养瓶中挖出,洗净根上的培养基,将生根苗在自来水中浸泡1h,移栽到泥炭土上,进行栽培管理,得到红椿植株。
优选,所述的步骤A的消毒是将红椿种子用体积分数75%乙醇水溶液灭菌1min,无菌水冲洗1次,质量分数10%次氯酸钠水溶液灭菌15min~20min,无菌水冲洗3~5次。
优选,所述的步骤D的炼苗是打开培养瓶盖让生根苗适应2d。
优选,所述的步骤D的泥炭土是高温灭菌过的泥炭土。
所述的步骤A的固体MS培养基每升含有蔗糖30g和琼脂5g,余量为MS培养基,pH5.8~6.0。
所述的MS培养基为国际通用的培养基,其成份和配置方法见Murashige T,Skoog F(1962)A revised medium for rapid growth and bioassay with tobacco tissue cultures.Physiol Plant 15:473–497。
本发明的以子叶节为外植体的高效组织培养和植株再生方法,可摆脱外界条件的影响,规模化和工厂化生产出健壮、整齐一致的红椿组培幼苗;与已经报道的以红椿大树茎段作为外植体构建再生体系相比,具有操作方便、取材广泛、可重复性强及效率高等优势。该方法可满足市场对种苗的需求,为红椿种质资源可持续利用奠定基础。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息,商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于华南农业大学,未经华南农业大学许可,擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作,请联系【客服】
本文链接:http://www.vipzhuanli.com/pat/books/201611247903.5/2.html,转载请声明来源钻瓜专利网。
- 上一篇:提高罗汉果苷Ⅳ含量的方法
- 下一篇:提高罗汉果中角鲨烯含量的方法