[发明专利]细胞生长因子组合物及其制备方法、美容制剂，以及用途

说明书

技术领域

本发明涉及化妆品以及医学美容的技术领域，具体而言，涉及细胞生长因子组合物及其制备方法、美容制剂，以及用途。

背景技术

富血小板血浆(platelet-rich plasma，PRP)是将动物或人的全血经过离心后得到的富含高浓度血小板的血浆，在其中加入凝血酶后可变为胶状物，因此也被称为富血小板凝胶或富血小板白细胞凝胶(platelet-leukocyte-enriched gel,PLG)。PRP中含有大量的生长因子。研究发现，PRP未被激活时，其血小板中α颗粒释放的生长因子量较少，而被激活后其生长因子释放量则大大增加，并且激活后的PRP促增殖作用明显强于未激活组。并且随着凝血酶浓度的增加，PRP释放生长因子的量也随之增加。提取制备的缺点。

PRP被激活后，血小板中α颗粒释放的生长因子能通过跨膜受体结合到靶细胞膜的外表面，跨膜受体诱导并激活内源性蛋白信号后，进一步激活细胞内的第二信号，后者能够诱导细胞内多种基因的表达，如基质的形成、胶原蛋白的合成等。另外在血小板的激活过程中，纤维蛋白原转变成的纤维蛋白也能促进创伤组织的愈合，其作用主要表现在参与凝血过程、收缩创面并为细胞的增殖提供三维空间结构等。PRP凝胶是指血小板被激活后释放生长因子的同时，其纤维蛋白原转变为纤维蛋白并连接成网，所形成的乳白色胶状物，其具有一定强度和黏附性。

富血小板血浆具有以下几方面优点：(2)自体的富血小板血浆不可能出现传染病交叉感染或免疫抑制等现象；(3)使用自体血液不存在医学伦理学问题；(4)加速组织的修复与再生，可促进毛细血管的新生；(6)加速慢性创面上皮的形成。即便如此，PRP还是存在着一些亟待解决的问题。

然而，目前还存在以下问题有待解决：①PRP的制备尚无统一标准，需建立一套高效稳定的制备方法，标准化制备的PRP可以为其应用于研究与临床提供可靠的质量保证。②PRP浓度与促组织再生之间的量效与时效关系尚未完全阐明。③PRP中各生长因子的活性、细胞分子生物学机制及相互间的作用尚未完全阐明。④不能长时间起作用，应用在术区后众多生长因子多在第一个小时大量的释放，缺乏中期或长期的效果观察；⑤较快速度溶解，不能起到良好支撑作用；⑥白细胞随之浓缩后的作用及安全性尚不清晰；⑦由于只能使用自体PRP，其应用推广及产业化受到限制，有学者提出同种异体PRP取代自体PRP，这样可以减少病人的二次创伤，但目前来说还是受到异体排斥、交叉传染以及伦理等因素的限制。

发明内容

有鉴于此，本发明一方面在于提供一种细胞生长因子组合物，该细胞生长因子组合物能较好地对细胞生长因子进行缓释控制。

一种细胞生长因子组合物，其包含纤维蛋白胶和由壳聚糖微球包覆细胞生长因子所形成的细胞生长因子复合壳聚糖微球，所述细胞生长因子复合壳聚糖微球的含量为50～200μg，以纤维蛋白胶的质量为1g计。

进一步地，所述纤维蛋白胶包含10～50mg纤维蛋白原，50～200IU凝血酶、1～20IU第VIII因子、0.01～0.2M钙离子，以纤维蛋白胶的质量为1g计。

进一步地，所述细胞生长因子复合壳聚糖微球的直径为0.5～5μm。

进一步地，所述细胞生长因子选自PDGF、VEGF、TGF-β1、EGF和IGF-1中的一种或二种以上；

优选地，所述细胞生长因子包含10～30ng PDGF、0.1～1ng VEGF、10～150ng TGF-β1、0.2～0.5ng EGF和10～50ng IGF-1，以纤维蛋白胶的质量为1g计。

本发明另一方面在于提供一种细胞生长因子组合物的制备方法，该制备方法所获得的细胞生长因子组合物能较好地对细胞生长因子进行缓释控制。

一种如上述细胞生长因子组合物的制备方法，包括以下步骤：

(1)将壳聚糖分散于酸液、表面活性剂和硫酸盐，形成空壳聚糖微球；

(2)将细胞生长因子和所述空壳聚糖微球分散于酸液中，形成细胞生长因子复合壳聚糖微球；

(3)将纤维蛋白胶和所述细胞生长因子复合壳聚糖微球混合。

进一步地，步骤(1)中：

所述酸液为冰醋酸溶液；

优选地，所述酸液的质量分数为1～5wt％；

优选地，所述表面活性剂为吐温-80；

优选地，所述硫酸盐的质量分数为15～25wt％；

优选地，所述分散之后还由先之后依次包括离心分离、用水洗涤干燥。

进一步地，步骤(2)中：