[发明专利]一种G5-MoS2

说明书

本发明涉及一种G5‑MoS₂/Bcl‑2siRNA复合物的制备方法，包括：将LA经过EDC·HCl和NHS活化，得到活化的LA；然后将活化的LA滴加到G5.NH₂的溶液中，反应24h，透析，冷冻干燥，得到G5‑LA；将G5‑LA加入到MoS₂溶液中，超声振荡，搅拌12h，离心，洗涤，得到G5‑MoS₂纳米花；将G5‑MoS₂纳米花与Bcl‑2 siRNA孵育20～30min，得到G5‑MoS₂/Bcl‑2 siRNA复合物。本发明的方法具有工艺简单，易操作，光热转换效率高，转染条件简单，转染效率高等优点，在光热和基因双重治疗中有良好的应用前景。

技术领域

本发明属于光热和基因双重治疗中纳米材料的制备领域，特别涉及一种G5-MoS₂/Bcl-2 siRNA复合物的制备方法。

背景技术

癌症治疗方法的探索，是一个不断发展又不断遇到挑战的过程。传统的治疗方法比如外科手术，化学治疗和放射治疗存在着很多缺点，这些缺点体现在以下几个方面：第一，肿瘤部位不能完全被切除，可能导致肿瘤的再生和转移；第二，长期的化疗可能导致肿瘤的多重耐药性；第三，对正常的细胞也存在损伤，进而引发恶心，脱发和乏力等副作用。因此，开发一种新型的肿瘤治疗体系显得至关重要。这种体系需要对生物体友好，同时具有高效的肿瘤治疗效率和较低的副作用。近些年，光热治疗作为一种新型的，副作用少的，短期的治疗方法，吸引了很多研究者的关注。光热治疗是利用具有较高光热转换效率的材料，在外部光源(一般是近红外光)的照射下杀死癌细胞的一种治疗方法。在这种情况下，光热治疗剂能吸收光能并将光能转化为热能来产生较高的温度，从而导致癌细胞的死亡。

随着光热治疗方法的兴起，迄今已经发展了四代材料体系：第一种，具有高光热转换效率的贵金属纳米材料，比如金(Au)、银(Ag)、钯(Pd)等，但其价格昂贵限制其广泛运用；第二种，具有较大光热转换面积的碳类材料，包括石墨烯和碳纳米棒等，但是其亲水性和近红外吸收能力较差；第三种，有机染料，比如吲哚菁绿、普鲁士蓝等，虽然拥有较高的光热转换效率但容易被分解；第四种，金属和非金属化合物，例如硫化铜(CuS)和硫化锌(ZnS)，虽在光热治疗上具有较好的应用前景，但是却也存在着对组织和细胞潜在的慢性毒性。二硫化钼(MoS₂)作为一种过渡金属二硫化物无机材料，具有独特的结构特点和近红外吸收能力，其良好的生物相容性和强的光热转换效率使其成为一种安全高效的新型光热剂。然而仅仅通过光热治疗并不能够保证将癌细胞完全的杀死，因此考虑通过协同治疗来实现癌症的治疗。

由小干扰RNA(siRNA)介导的基因治疗作为另一种有前景的治疗方法，已成为一种热点研究课题。siRNA通过在细胞内诱导特异性的基因沉默从而杀死癌细胞。然而，siRNA容易被细胞内的酶降解，而且由于其与细胞表面类似的电荷使其不易被细胞内吞。因此，摆在研究者面前的难题依旧是研发一种安全而高效的基因传递载体用于siRNA的传递。在前期的工作中，树状大分子包裹的金纳米颗粒和功能化的树状大分子包裹的金纳米颗粒都被证明是一种安全高效的基因传递载体。因此，将光热治疗和基因治疗结合在一起是一种合理的，并可执行的双重治疗方法。

检索国内外相关文献和专利结果表明：以第五代聚酰胺胺树状大分子修饰的二硫化钼作为载体，实现光热和基因双重治疗的方法，尚未见报道。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种G5-MoS₂(第五代聚酰胺胺树状大分子修饰的二硫化钼)/Bcl-2 siRNA复合物的制备方法，该方法具有工艺简单，易操作，光热转换效率高，转染条件简单，转染效率高等优点，在肿瘤的光热和基因双重治疗中有良好的应用前景；制备的第五代聚酰胺胺树状大分子修饰的二硫化钼能实现癌细胞的光热治疗同时负载的Bcl-2 siRNA能诱导特异性癌细胞基因沉默。