[发明专利]一种西曲瑞克的制备方法

权利要求书

1.一种西曲瑞克的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：

(1)制备Fmoc-D-Ala-树脂复合物：用二甲基甲酰胺溶解C端氨基酸Fmoc-D-Ala-OH及酯化试剂后，加入到用二甲基甲酰胺浸泡处理后的树脂中进行酯化反应，反应结束后，用二甲基甲酰胺洗涤树脂，得到Fmoc-D-Ala-树脂复合物；

(2)制备保护的西曲瑞克-树脂复合物：向步骤(1)得到的Fmoc-D-Ala-树脂复合物中加入Fmoc脱保护试剂进行Fmoc脱保护反应，反应结束后过滤并用二甲基甲酰胺洗涤树脂，然后向脱保护的Fmoc-D-Ala-树脂复合物中加入西曲瑞克的C端第二个氨基酸和缩合试剂进行缩合反应，缩合反应结束后用二甲基甲酰胺洗涤树脂；按照西曲瑞克从C端到N端的顺序，更换氨基酸，重复Fmoc脱保护反应和缩合反应，得到保护的西曲瑞克-树脂复合物；

(3)制备脱保护的西曲瑞克-树脂复合物：向保护的西曲瑞克-树脂复合物中加入切割试剂，脱除多肽侧链保护基；反应结束后过滤，并加入洗涤溶剂洗涤树脂，过滤，得到脱保护的西曲瑞克-树脂复合物；

(4)制备西曲瑞克粗品：向脱保护的西曲瑞克-树脂复合物中加入氨解试剂，反应结束后，过滤，收集滤液，旋蒸后得到西曲瑞克粗品；

(5)制备西曲瑞克精品：采用反相高效液相色谱分离纯化西曲瑞克粗品，得到西曲瑞克精品。

2.根据权利要求1所述的西曲瑞克的制备方法，其特征在于：步骤(1)中所述的树脂为Merrifield树脂、羟甲基树脂、4-羟甲基苯乙酰胺甲基树脂或4-羟甲基苯甲酰胺甲基树脂。

3.根据权利要求1所述的西曲瑞克的制备方法，其特征在于：步骤(1)中所述的酯化试剂包含N,N-二环己基碳二亚胺和N,N-二异丙基碳二亚胺中的任意一种以及1-羟基苯并三氮唑和二甲氨基吡啶；

所述的Fmoc-D-Ala-OH、N,N-二环己基碳二亚胺和N,N-二异丙基碳二亚胺两者中的任意一种以及1-羟基苯并三氮唑的物质的量的比例为1：1.2～1：1.2～1；所述的Fmoc-D-Ala-OH与树脂的物质的量的比例为7～3：1；所述的二甲氨基吡啶与树脂的物质的量的比例为0.5～0.1：1；所述酯化反应的温度为20℃～60℃，反应时间为3小时～20小时。

4.根据权利要求1所述的西曲瑞克的制备方法，其特征在于：步骤(2)中所述的Fmoc脱保护试剂是体积比为1：1～4的哌啶与二甲基甲酰胺，所述Fmoc脱保护反应的温度为20℃～60℃，反应时间为10min～60min。

5.根据权利要求1所述的西曲瑞克的制备方法，其特征在于：步骤(2)中所述的氨基酸依次分别为：N-芴甲氧羰酰基-脯氨酸，N-芴甲氧羰-2,2,4,6,7-五甲基二氢苯并呋喃-5-磺酰-精氨酸，N-芴甲氧羰酰基-亮氨酸，N-芴甲氧羰酰基-D-瓜氨酸盐酸盐，N-芴甲氧羰酰基-O-叔丁基-酪氨酸，N-芴甲氧羰酰基-O-叔丁基-丝氨酸，N-芴甲氧羰酰基-D-3-吡啶-丙氨酸，N-芴甲氧羰酰基-D-4-氯-苯丙氨酸，以及乙酰基-D-3-(2-萘基)-丙氨酸。