[实用新型]快速去除细胞冻存液的装置

说明书

技术领域

本实用新型涉及一种快速去除细胞冻存液的装置。

背景技术

细胞移植作为一种新的治疗手段，正快步进入临床。目前，在国际上正规登记的细胞治疗临床试验超过5000个。

用于移植治疗的细胞通常长期低温（-80^oC以下）储存，可临床随时使用，或备自己将来使用。细胞储存需要放入特殊的冻存液中，目前的冻存液大多基于关键成分二甲基亚砜 (Dimethyl sulfoxide， DMSO)。DMSO具有一定的毒性，与蛋白质疏水集团发生作用，导致蛋白质变性；进入人体可产生血管毒性和肝、肾损害。因此，冻存的细胞在复温后需立即去除冻存液，以减少DMSO对细胞的毒性作用；另外，在细胞植入人体前，也需要去除冻存液，以避免其对人体的毒害。

目前去除冻存液的方法是采用离心法，将细胞与冻存液离心后分层，去除上层的冻存液，再加入生理液体（如生理盐水、磷酸缓冲液、细胞培养液等）重悬细胞，再次离心，以去除残留的冻存液。因这一过程需要离心机和洁净环境（如超净工作台、生物安全柜等），通常需要在实验室完成。而细胞治疗许多时候用于急性疾病，可能会因为实验室不能随时准备细胞而丧失最佳治疗时机；另外，许多医院没有准备细胞的实验室条件。因此，这一过程在一定程度上会限制细胞治疗的临床应用；迫切需要一种医生或护士能够随时使用的不依赖实验室的装置。

发明内容

本实用新型的目的是提供一种快速去除细胞冻存液的装置。

本实用新型提供了一种去除细胞冻存液的装置，它包括细胞洗涤管，下部带有微孔的过滤套管,和细胞收集液管。其特征在于（1）套管下部的周边及底部带有微孔，孔径小于冻存细胞；（2）细胞洗涤管容量大于套管，以利于细胞充分洗涤；（3）细胞收集液管的底部与套管底部吻合，如均为平底，两者之间不留空隙，以利于细胞回收。

所述的过滤套管，其特征在于，管的底部和中下部管壁有微孔，微孔大小小于冻存的细胞或其它物体的大小，使其不能从微孔通过，具体可依冻存的物体的大小而定，如用于冻存的细胞，其微孔大小多在2-10μm；如储存物为细胞聚集体、组织块、体外生成的微小组织或器官等，微孔可适当增大。制做滤网的材料包括尼龙、塑料等。

本装置还可用于快速去除任何储存或孵育细胞、组织、微小器官等的液体。

附图说明

图1为去除冻存液的装置，包括A. 细胞洗涤管；B. 下部带有微孔的套管；C. 细胞收集液管。

图2为去除冻存液装置的使用方法。在细胞洗涤管中加入细胞洗涤液（如生理盐水）（1），将带有微孔的套管插入细胞洗涤管（2），将解冻的细胞加入套管内的洗涤液中，提起、放下套管数次，使细胞充分洗涤（3和4），提出套管，放入盛有细胞收集液（如生理盐水）的管中（5），用注射器收集细胞，备用（6）。

具体实施方式

下面结合附图对本实用新型做进一步说明，但本实用新型并不局限于以下实施例。

本实用新型提供了一种去除细胞冻存液的装置，它包括A. 细胞洗涤管；B. 下部带有微孔的过滤套管；C. 细胞收集液管（图1）。过滤套管上的微孔依据细胞的大小而定。

用本装置去除间充质干细胞冻存液（图2），方法如下：

在细胞洗涤管（可采用50ml无菌塑料离心管）中加入细胞洗涤液（如生理盐水）40ml（1），将带有微孔（直径3μm）的套管插入细胞洗涤管中（2）；从液氮罐中取出冻存的间充质干细胞1管（10⁷细胞），快速放入37^oC的水中，待解冻后快速将细胞（细胞和冻存液，通常为1-2ml）吸入注射器（或移液管）并注入到套管内的洗涤液中，提起、放下套管数次，使细胞充分洗涤（3）；提出套管(4)，放入盛有20ml（量根据注射需要而定）细胞收集液（如生理盐水或细胞移植液）的管中(5)，使细胞浮起，将细胞和收集液吸入注射器，用于注入人体或动物注射。

将细胞洗涤液离心（1500 rpm，5 min），沉渣显微镜下分析，未见完整细胞，显示无完整细胞透过微孔。