[发明专利]在植物中产生轮状病毒样颗粒

权利要求书

1.在宿主或宿主细胞中产生轮状病毒样颗粒(RLP)的方法，其包括：

a)提供包含一种或多种核酸的宿主或宿主细胞，所述一种或多种核酸包含：

编码第一轮状病毒蛋白的第一核苷酸序列、编码第二轮状病毒蛋白的第二核苷酸序列和编码第三轮状病毒蛋白的第三核苷酸序列，所述第一核苷酸序列、所述第二核苷酸序列和所述第三核苷酸序列可操作地连接到在所述宿主或宿主细胞中有活性的一种或多种调控区；并且

所述第一核苷酸序列编码轮状病毒蛋白NSP4，所述第二核苷酸序列编码轮状病毒蛋白VP6，以及所述第三核苷酸序列编码轮状病毒蛋白VP7或VP4之一；

b)在允许表达所述一种或多种核酸的条件下孵育所述宿主或宿主细胞，使得NSP4、VP6中的每一种以及VP7或VP4被表达，从而产生RLP。

2.如权利要求1所述的方法，其中所述一种或多种核酸还包含编码第四轮状病毒蛋白的第四核苷酸序列，所述第一核苷酸序列、所述第二核苷酸序列、所述第三核苷酸序列和所述第四核苷酸序列可操作地连接到在所述宿主或宿主细胞中有活性的一种或多种调控区；并且

所述第一核苷酸序列编码轮状病毒蛋白NSP4，所述第二核苷酸序列编码轮状病毒蛋白VP6，以及所述第三核苷酸序列和所述第四核苷酸序列编码轮状病毒蛋白VP2、VP4或VP7，并且其中从所述一种或多种核酸表达NSP4、VP6中的每一种以及VP2、VP4和VP7中的两种。

3.如权利要求2所述的方法，其中所述一种或多种核酸还包含编码第五轮状病毒蛋白的第五核苷酸序列，所述第一核苷酸序列、所述第二核苷酸序列、所述第三核苷酸序列、所述第四核苷酸序列和所述第五核苷酸序列可操作地连接到在所述宿主或宿主细胞中有活性的一种或多种调控区；并且

所述第一核苷酸序列、所述第二核苷酸序列、所述第三核苷酸序列、所述第四核苷酸序列和所述第五核苷酸序列编码轮状病毒蛋白VP2、VP4、VP6、VP7或NSP4之一，并且其中从所述一种或多种核酸表达VP2、VP4、VP6、VP7和NSP4中的每一种。

4.如权利要求3所述的方法，其中所述一种或多种核酸包含一种核酸，其包含编码所述第一轮状病毒蛋白、所述第二轮状病毒蛋白、所述第三轮状病毒蛋白、所述第四轮状病毒蛋白和所述第五轮状病毒蛋白的所述第一核苷酸序列、所述第二核苷酸序列、所述第三核苷酸序列、所述第四核苷酸序列和所述第五核苷酸序列。

5.如权利要求3所述的方法，其中所述一种或多种核酸包含两种核酸：第一核酸，其包含编码所述第一轮状病毒蛋白的所述第一核苷酸序列；和第二核酸，其包含编码所述第二轮状病毒蛋白、所述第三轮状病毒蛋白、所述第四轮状病毒蛋白和所述第五轮状病毒蛋白的所述第二核苷酸序列、所述第三核苷酸序列、所述第四核苷酸序列和所述第五核苷酸序列。

6.如权利要求3所述的方法，其中所述一种或多种核酸包含两种核酸：第一核酸，其包含编码所述第一轮状病毒蛋白和所述第二轮状病毒蛋白的所述第一核苷酸序列和所述第二核苷酸序列；和第二核酸，其包含编码所述第三轮状病毒蛋白、所述第四轮状病毒蛋白和所述第五轮状病毒蛋白的所述第三核苷酸序列、所述第四核苷酸序列和所述第五核苷酸序列。

7.如权利要求3所述的方法，其中所述一种或多种核酸包含三种核酸：第一核酸，其包含编码所述第一轮状病毒蛋白和所述第二轮状病毒蛋白的所述第一核苷酸序列和所述第二核苷酸序列；第二核酸，其包含编码所述第三轮状病毒蛋白和所述第四轮状病毒蛋白的所述第三核苷酸序列和所述第四核苷酸序列；和第三核酸，其包含编码所述第五轮状病毒蛋白的所述第五核苷酸序列。

8.如权利要求3所述的方法，其中所述一种或多种核酸包含三种核酸：第一核酸，其包含编码所述第一轮状病毒蛋白的所述第一核苷酸序列；第二核酸，其包含编码所述第二轮状病毒蛋白的第二核苷酸序列；和第三核酸，其包含编码所述第三轮状病毒蛋白、所述第四轮状病毒蛋白和所述第五轮状病毒蛋白的所述第三核苷酸序列、所述第四核苷酸序列和所述第五核苷酸序列。