[发明专利]细胞培养方法及细胞培养装置

说明书

本发明提供一种细胞培养方法及细胞培养装置，使由挠性材料制成的容器(1)的底面局部地隆起而隔开为多个分区(10)，在每个被隔开的分区(10)中培养细胞(C)，之后，通过消除分区(10)而扩大容器内的培养面积。由此，能够适度地维持培养时的细胞密度，此外在使细胞大量增殖时取消培养容器的转移操作，能够减少对细胞的损害、降低污染的风险。

技术领域

本发明涉及在人工环境下培养细胞的细胞培养方法及细胞培养装置。

背景技术

近年来，在药品的生产、或基因治疗、再生医疗、免疫疗法等领域中，要求在人工环境下高效大量地培养细胞或组织、微生物、病毒等(将这些总称为“细胞”)。在这样的细胞培养中，随着培养液(以下是指包含细胞及培养基的液体)内的细胞密度变高，会引起增殖所必需的培养基成分的枯竭、细胞自身的代谢产物的蓄积，从而增殖速度降低，细胞密度达到饱和。因此，在以一定程度的规模培养细胞的情况下，通常一边重复继代一边进行培养以适当地维持细胞密度。

在该继代时，有时要从孔板向烧瓶等转移。例如，使用细胞培养孔板以达到适度的细胞密度的方式将细胞与培养基一起加入各个孔中而开始培养，在孔内使细胞充分地增殖后转移到细胞培养烧瓶中，与细胞增殖匹配地追加培养基而进行培养，同时进行继代，在增殖到一定量的时间点，转移到容量更大的烧瓶或袋等中，再重复进行培养和培养基的补给、继代，进行细胞的大量培养(例如参照专利文献1[0027]段等)。

另外，在使用经过冷冻保存的细胞时，也有如下的方法，即，在融化后，为了恢复细胞本来的功能而使用孔板在高密度状态下进行数日的培养(以下称作“养护培养”)，在使细胞的功能恢复为本来的状态后转移到烧瓶中进行培养(以下称作“扩大培养”)，其后，进行实施抗体刺激的活性化培养(例如参照专利文献2[0057]段等)。

需要说明的是，在这样的细胞培养时，以往使用的是孔板、烧瓶等器具，然而近年来，开始取代这些器具而使用将树脂膜之类的挠性材料制袋而成的培养袋(参照专利文献3、4)。孔板、烧瓶等器具不适于培养大量的细胞，与之不同，培养袋由于容易大容量化，因此不仅能够进行大量培养，而且能够以封闭体系进行细胞培养，还具有能够减少培养期间中的菌、病毒的污染风险的优点。因此，在超过实验室水平地以一定程度的规模大量培养细胞的情况下，倾向于使用培养袋。

现有技术文献

专利文献

专利文献1：日本特开2011-241159号公报

专利文献2：日本特开2013-215141号公报

专利文献3：国际公开2012/032761号小册子

专利文献4：国际公开2008/136371号小册子

发明内容

发明所要解决的问题

然而，在这样的细胞培养中，在从孔板转移到烧瓶时需要反复进行数次移液操作，另外，在每次继代时必须将细胞移动到新的烧瓶、袋等培养容器中，不仅操作变得烦杂，而且有可能对细胞造成损害。此外，还有污染(contamination)的风险高的问题。

本发明是鉴于上述情况而完成的，其目的在于，提供一种细胞培养方法及细胞培养装置，能够适度地维持培养时的细胞密度，而且在使细胞大量增殖时能够取消培养容器的转移操作，减少对细胞的损害、降低污染的风险。

用于解决问题的方案

本发明的细胞培养方法将培养基与细胞一起向由挠性材料制成的容器供给而进行细胞培养，使所述容器的底面局部地隆起而隔开为多个分区，在每个所述分区中培养所述细胞，之后，消除所述分区，由此扩大所述容器内的培养面积。