[发明专利]VEGFA/Ang2化合物

说明书

本发明涉及一种化合物，其结合至人血管内皮生长因子A(VEGFA)和人血管生成素‑2(Ang2)，且可用于治疗血管生成性眼病，诸如糖尿病性及其他增生性视网膜病变，以及癌症，特别是由VEGFA和Ang2驱动的实体瘤，包括胃癌、肺癌、肝细胞癌、卵巢癌、结肠直肠癌和乳腺癌。

本发明涉及医药领域。更具体地，本发明涉及结合至人血管内皮生长因子A(VEGFA)和人血管生成素-2 (Ang2)，且可用于治疗血管生成性眼病，诸如糖尿病性及其他增生性视网膜病变，以及癌症，特别是由VEGFA和Ang2驱动的实体瘤，包括胃癌、肺癌、肝细胞癌、卵巢癌、结肠直肠癌和乳腺癌的化合物。

癌症的标志是持续的新血管形成，被称为血管生成。血管内皮生长因子(VEGF)途径是调控血管生成的重要信号传导级联；人VEGFA是VEGF途径中的关键配体。

血管生成素-1 (Ang1)和Ang2是调控血管生成的另一关键途径的成员；Ang1和Ang2是结合内皮细胞特异性受体酪氨酸激酶Tie2的分泌因子。Ang1由外周细胞组成型分泌且经由Tie2受体稳定血管完整性。Ang2仅响应于刺激(例如伤口愈合、肿瘤生长)从内皮细胞释放且经由Tie2信号传导促进血管出芽(blood vessel sprouting)并抑制外周细胞-内皮细胞相互作用。当与VEGF阻断剂阿柏西普(aflibercept)组合给药时，针对人Ang2的抗体已显示在小鼠异种移植肿瘤模型中抑制肿瘤生长且降低肿瘤血管分布(Daly等人, CancerRes (2013) 73(1):108)。多种研究性Ang2抗体目前正在临床试验中。

已提出抑制血管生成的VEGF和Ang/Tie2途径两者可能用于改善针对癌症的结果(参见，例如，Daly等人, Cancer Res (2013) 73:108)。目前，VEGFA抗体和Ang-2抗体的共施用需要注射或输注两种单独产物或施用抗体混合物的共同制剂。单独施用允许剂量量和时机的灵活性，但由于增加的输注时间而对于患者顺从性和方便性存在潜在问题。共同制剂也可提供关于剂量量的一些灵活性，但由于两种不同抗体的不同分子特征，对于发现允许两种抗体的化学和物理稳定性的配制条件会是挑战性的。此外，共施用或共同制剂涉及两种药物治疗的累加成本。

WO2012/009705公开了含有一个或多个模块识别结构域(MRD)的复合物，其中，所述MRD连接至包括抗体的支架。将Ang2列为考虑用于复合物的MRD部分，且将VEGFA抗体指定为可连接MRD的抗体。没有例举针对连接至VEGFA抗体的Ang2的MRD。WO2010/040508、WO2011/117329和WO2012/131078请求保护针对VEGFA和Ang-2的双特异性抗体。

仍然需要提供通过结合并中和人VEGFA和人Ang2两者来抑制两种血管生成途径的化合物。具体而言，仍然需要提供如下化合物：其通过结合并中和人VEGFA和人Ang2两者来抑制两种血管生成途径，且由于使用Ang2 scFv而不损害显著Ang2体外结合活性，且由于将VEGFA抗体和Ang2 scFv组合成一种化合物而不损害基于细胞的显著体外测定活性。仍然需要提供中和Ang2介导的Tie2磷酸化，但不中和Ang1介导的磷酸化的化合物。

因此，本发明的一个实施方案提供一种化合物，其包含通过两个接头融合至两个单链片段可变(scFv)多肽的抗体，其中：

a) 所述抗体包含两个相同重链(HC)和两个相同轻链(LC)，其中每个HC包含其氨基酸序列在SEQ ID NO: 1中给出的重链可变区(HCVR)，且其中每个LC包含其氨基酸序列在SEQ ID NO: 4中给出的轻链可变区(LCVR)，

b) 两个scFv多肽相同且各自包含可操作连接至LCVR的HCVR，其中每个HCVR具有SEQ ID NO: 7中给出的氨基酸序列，且其中每个LCVR具有SEQ ID NO: 8中给出的氨基酸序列，且

c) 两个接头是相同的富含甘氨酸的接头，其各自使抗体的一个HC的羧基末端可操作连接至scFv多肽之一的氨基末端。