[发明专利]从发酵液分离鼠李糖脂的方法

说明书

一种从鼠李糖脂发酵混合物提取至少一种鼠李糖脂化合物的方法，所述方法包括以下步骤：(a)将惰性吸附载体与鼠李糖脂发酵混合物混合；(b)在高于31℃的温度和高于73巴的压力下将混合物溶解在有机溶剂中；(c)分离至少一种脂肪化合物；(d)向所述有机溶剂中加入共溶剂；(e)改变温度和/或压力；(f)分离第一鼠李糖脂化合物；和(g)分离第二鼠李糖脂化合物。

技术领域

本发明涉及从鼠李糖脂发酵培养基分离鼠李糖脂化合物。

背景技术

生物表面活性剂如鼠李糖脂可以通过使用可再生生物质和各种细菌如铜绿假单胞菌或其他合适的微生物生物体与可以是植物油或动物油或糖的原料一起发酵而生产。

然而，必须进一步处理所得发酵混合物或“发酵液”以除去/纯化鼠李糖脂。其他发酵液成分包括不完全反应的进料底物，例如甘油三酯、甘油二酯和甘油单酯，还有脂肪酸，以及细胞成分和糖等。高回收和纯化成本是鼠李糖脂的大规模商业化所要克服的主要障碍。

Heyd等(Anal.Bioanal.Chem.(2008)391，1579)提供了生物表面活性剂分析和纯化的总结。Reiling等(Appl.Environ.Microbiol.(1986)，51(5)，985)公开了使用铜绿假单胞菌生产鼠李糖脂生物表面活性剂的中试方法。EP 0317036公开了一种制备L-鼠李糖的方法，该方法包括在低pH下在有机羧酸的水溶液中加热。

发明内容

本发明的目的是提供从发酵混合物提取鼠李糖脂化合物的改进方法。

因此，本发明提供了一种从鼠李糖脂混合物提取至少一种鼠李糖脂化合物的方法，所述方法包括以下步骤：

(a)将惰性吸附载体与鼠李糖脂混合物混合；

(b)在高于31℃的温度和高于73巴的压力下将混合物溶解在有机溶剂中；

(c)分离至少一种脂肪化合物；

(d)向所述有机溶剂中加入共溶剂；

(e)改变温度和/或压力；

(f)分离第一鼠李糖脂化合物；和

(g)分离第二鼠李糖脂化合物。

采用本发明，用于收获鼠李糖脂化合物的方法在效力、准确性和环境影响方面大大改善。

优选地，步骤(f)和(g)的鼠李糖脂提取是在共溶剂的加入(d)和步骤(e)中温度和/或压力的增加之后。

优选地，步骤(c)在步骤(d)至(f)之前。优选地，水也在步骤(c)中除去。

优选地，步骤(c)采用并联的多个提取/分离容器进行，借此水在一个容器中分离而脂肪化合物在不同的容器中分离。

优选地，脱脂步骤(c)被延长至几乎没有油或水被提取。

优选地，步骤是按字母顺序排序的。

优选地，在步骤(e)中减小压力。优选地，这足以提供有机溶剂中的相变。在CO₂的情况下，此压力减小应足以将超临界CO₂转化为液体CO₂。

优选地，多个提取/分离器容器被用于步骤(f)和(g)。

一般而言，混合和溶解步骤(a)和(b)在步骤(c)至(g)之前。步骤(c)至(g)可以以任何适当的顺序进行。例如，加入共溶剂的步骤(d)优选在步骤(e)中改变温度和/或压力之前。在一些实例中，分离脂肪化合物步骤(c)可以在步骤(d)和(e)之后。