[发明专利]包含LG12进化枝蛋白酶变体的组合物和方法

权利要求书

1.一种蛋白酶变体、或重组多肽或其活性片段，其包含氨基酸序列，其中所述氨基酸序列与SEQ ID NO: 10相比差异在于在多个位置的两个或更多个取代，其中所述两个或更多个取代选自以下任意一组：

G053D-N076D-G166D;

N076D-G118R-G166D;

N076D-G166D-N256R;

G053D-N076D-G118R-G166D-N256R;

其中所述变体或重组多肽或其活性片段的氨基酸位置通过与SEQ ID NO: 10的氨基酸序列相对应来编号，

其中所述蛋白酶变体、或重组多肽或其活性片段当与SEQ ID NO: 10和/或48相比时具有一个或多个选自以下的改进的特性：改进的清洁性能、改进的稳定性、和改进的残留蛋白酶活性。

2.如权利要求1所述的蛋白酶变体、或重组多肽或其活性片段，其中所述变体或重组多肽或其活性片段进一步包含EPNALQDGNGHGTH（SEQ ID NO: 44）基序。

3.如权利要求2所述的蛋白酶变体、或重组多肽或其活性片段，其中所述基序从残基E54延伸至H67，其中所述氨基酸位置通过与SEQ ID NO: 10的氨基酸序列相对应来编号。

4.如权利要求1-3任一项所述的蛋白酶变体、或重组多肽或其活性片段，前提条件是所述变体或重组多肽或其活性片段不包含WP_047970940、WP_010192403、KPB_03414、BAD11988、BAD21128、Bhon03321、DSM9712_SprC、DSM6951_SprC、或DSM9711_SprC。

5.如前述权利要求1所述的蛋白酶变体、或重组多肽或其活性片段，其中所述蛋白酶变体、或重组多肽或其活性片段在表面活性剂存在下具有蛋白酶活性、在洗涤剂组合物中具有清洁活性、或具有其组合。

6.如权利要求5所述的蛋白酶变体、或重组多肽或其活性片段，其中所述洗涤剂组合物是自动餐具洗涤剂或衣物洗涤剂，和/或所述清洁活性包含水解在蛋白质污渍上的底物。

7.如权利要求1所述的蛋白酶变体、或重组多肽或其活性片段，其中所述改进的特性是

（i）改进的残留蛋白酶活性，并且当根据实例1的稳定性测定进行测量时，所述蛋白酶变体、或重组多肽或其活性片段具有15%-100%、20%-100%、25%-100%、30%-100%、35%-100%、或40%-100%的残留蛋白酶活性；

（ii）改进的清洁性能，并且当根据实例1的洗涤剂测定中的清洁性能进行测量时，与SEQ ID NO: 48相比，所述蛋白酶变体、或重组多肽或其活性片段具有 ≥ 0.7的BMI清洁性PI；

（iii）改进的稳定性，并且当根据实例1的稳定性测定进行测量时，与SEQ ID NO: 10相比，所述蛋白酶变体、或重组多肽或其活性片段具有 ≥ 1.01或1.1或1.2的稳定性PI；和/或

（iv）改进的清洁性能，并且当根据实例1的洗涤剂测定中的清洁性能进行测量时，与SEQ ID NO: 10相比，所述蛋白酶变体、或重组多肽或其活性片段具有 ≥ 1.01或1.1或1.2的清洁性PI。

8.如前述权利要求1所述的蛋白酶变体、或重组多肽或其活性片段，其中所述蛋白酶变体、或重组多肽或其活性片段衍生自SEQ ID NO: 10的参比多肽。

9.一种LG12进化枝蛋白酶，所述LG12进化枝蛋白酶包含如权利要求1-8中任一项所述的蛋白酶变体或重组多肽或其活性片段。

10.一种清洁组合物，所述清洁组合物包含如权利要求1-8中任一项所述的蛋白酶变体、或重组多肽或其活性片段。