[发明专利]脂质双层集成SPP1连接子蛋白纳米孔和作为脂质双层集成纳米孔的SPP1连接子蛋白变体

权利要求书

1.一种编码SPP1连接子多肽变体的核酸分子，其中所述多肽包含与SEQ ID NO：4、SEQ ID NO：6、SEQ ID NO：8或SEQ ID NO：10的序列具有至少95％序列同一性的氨基酸序列。

2.根据权利要求1所述的核酸分子，其中所述多肽包含与SEQ ID NO：4、SEQ ID NO：6、SEQ ID NO：8或SEQ ID NO：10的序列具有至少99％序列同一性的氨基酸序列。

3.根据权利要求1所述的核酸分子，其中所述多肽包含SEQ ID NO：4、SEQ ID NO：6、SEQ ID NO：8或SEQ ID NO：10的氨基酸序列。

4.根据权利要求1所述的核酸分子，具有SEQ ID NO：3、SEQ ID NO：5、SEQ ID NO：7或SEQ ID NO：9的序列。

5.一种SPP1连接子多肽变体，其中所述多肽包含与SEQ ID NO：4、SEQ ID NO：6、SEQ ID NO：8或SEQ ID NO：10的序列具有至少95％序列同一性的氨基酸序列。

6.根据权利要求5所述的多肽，其中所述多肽包含与SEQ ID NO：4、SEQ ID NO：6、SEQ ID NO：8或SEQ ID NO：10的序列具有至少99％序列同一性的氨基酸序列。

7.根据权利要求5所述的多肽，其中所述多肽包含SEQ ID NO：4、SEQ ID NO：6、SEQ ID NO：8或SEQ ID NO：10的氨基酸序列。

8.一种SPP1连接子多肽变体，其中所述多肽包含由具有SEQ ID NO：3、SEQ ID NO：5、SEQ ID NO：7或SEQ ID NO：9的序列的核酸分子编码的氨基酸序列。

9.一种含导电通道的膜，包括：

(a)膜层；和

(b)SPP1连接子多肽变体，其结合到所述膜层中以形成孔，当跨越膜施加电势时，可以通过所述孔发生电导，其中所述SPP1连接子多肽变体选自：

(i)包含与SEQ ID NO：4、SEQ ID NO：6、SEQ ID NO：8或SEQ ID NO：10的序列具有至少95％序列同一性的氨基酸序列的多肽；

(ii)包含与SEQ ID NO：4、SEQ ID NO：6、SEQ ID NO：8或SEQ ID NO：10的序列具有至少99％序列同一性的氨基酸序列的多肽；

(iii)包含SEQ ID NO：4、SEQ ID NO：6、SEQ ID NO：8或SEQ ID NO：10的氨基酸序列的多肽；和

(iv)包含由具有SEQ ID NO：3、SEQ ID NO：5、SEQ ID NO：7或SEQ ID NO：9的序列的核酸分子编码的氨基酸序列的多肽。

10.根据权利要求9所述的含导电通道的膜，其中，所述SPP1连接子多肽变体包含可检测标记。

11.根据权利要求10所述的含导电通道的膜，其中所述可检测标记选自由以下所组成的组中：比色指示剂、GCMS标签化合物、荧光指示剂、发光指示剂、磷光指示剂、辐射指示剂、染料、酶、酶的底物、能量转移分子、量子点、金属颗粒和亲和标记。

12.根据权利要求9所述的含导电通道的膜，其中所述膜层包含脂质层。

13.根据权利要求12所述的含导电通道的膜，其中所述脂质层包含两亲性脂质。

14.根据权利要求13所述的含导电通道的膜，其中所述两亲性脂质包含磷脂，并且所述脂质层包含脂质双层。

15.根据权利要求12所述的含导电通道的膜，其中所述脂质层选自由平面膜层和脂质体组成的组中。

16.根据权利要求15所述的含导电通道的膜，其中所述脂质体选自由多层脂质体和单层脂质体组成的组中。

17.根据权利要求9所述的含导电通道的膜，其中所结合的SPP1连接子多肽变体在所述膜层中是可移动的。

18.根据权利要求9所述的含导电通道的膜，当施加电势时，其能够通过所述孔将单链核酸分子、双链核酸分子和/或多肽易位，其中所述含导电通道的膜能够进行多肽检测、识别、排序和鉴定。