[发明专利]用于确定非酒精性脂肪肝病的方法和组合物

权利要求书

1.一种从受试者的经处理生物样品回收类二十烷酸的方法，所述方法包括：

(a) 从受试者获得生物样品，所述生物样品选自由血液、血浆和血清组成的组；以及

(b) 用约2.5 mM丁羟甲苯(BHT)和0.6-0.7M的氢氧化钾(KOH)处理所述生物样品以水解酯化的类二十烷酸，其中在用KOH处理之前添加BHT，其中所述生物样品用KOH在37°C处理1小时；和

(c) 从所述受试者的经处理生物样品回收所述类二十烷酸，其中所回收的类二十烷酸包括8-HETrE和/或15-HETrE。

2.权利要求1所述的方法，其中大于60%的类二十烷酸被从所述受试者的经处理生物样品回收。

3.权利要求1所述的方法，其中所述类二十烷酸通过使用固相萃取(SPE)柱回收。

4.权利要求1所述的方法，其中所述生物样品用KOH在氩气中在37°C处理1小时。

5.通过用2.5 mM丁羟甲苯(BHT)和0.6-0.7M的KOH处理生物样品回收的8-HETrE的水平、15-HETrE的水平、17-HdoHE的水平及其任意组合在制备用于体外诊断非酒精性脂肪肝炎(NASH)与非酒精性脂肪肝(NAFL)的诊断工具中的用途，其中所述生物样品选自由血液、血浆和血清组成的组，所述生物样品用KOH在37°C处理1小时，并且与对照和/或NAFL受试者相比，选自由8-HETrE、15-HETrE、17-HDoHE及其任意组合组成的组的标志物的升高指示有NASH。

6.权利要求5所述的用途，其中所述8-HETrE的水平、15-HETrE的水平、17-HdoHE的水平及其任意组合以大于60%的回收率从所述生物样品回收。

7.权利要求5所述的用途，其中所述类二十烷酸通过使用固相萃取(SPE)柱从所述经处理的生物样品回收。

8.权利要求5所述的用途，其中所述诊断工具被表示为接受者操作特征曲线下面积(AUROC)值。

9.权利要求8所述的用途，其中所述AUROC值是至少0.8。

10.权利要求8所述的用途，其中所述AUROC值是至少0.9。