[发明专利]神经系统细胞的制造方法

说明书

通过本发明，提供了可以以高效率、且在短时间内直接诱导神经系统细胞的方法。本发明的方法不受作为材料使用的体细胞的性质、背景的影响，也容易大规模化，因此，可以稳定地供给神经系统细胞。通过本发明的方法得到的神经系统细胞在各种研究、医疗领域中是有用的。

技术领域

本发明涉及以体细胞为材料制造神经系统的细胞的方法。本发明此外还涉及通过前述方法得到的神经系统细胞、含有该细胞作为有效成分的用于治疗神经系统疾病的组合物。

背景技术

近年来与细胞有关的研究的进展、尤其是涉及多能性细胞的许多研究成果为获取可用于对个体移植的品质、量的治疗用细胞开辟了道路。已经开始针对数种疾病尝试对患者移植具有对其治疗有效的特征的细胞。

神经系统疾病也不例外，关于脊髓损伤、帕金森病、阿尔茨海默病、肌萎缩性侧索硬化症等疾病，针对使用源自胚胎干细胞(ES细胞)、诱导多能干细胞(iPS细胞)的神经系统的细胞或神经前体细胞的治疗的可能性进行了研究。

在神经系统疾病的再生医疗中，成为课题的是获取、制造治疗用细胞的手段。由于源自非自身供体的细胞、从胚胎干细胞分化出的细胞有排斥反应的担忧，因此期望从自身的细胞制造多能性干细胞(例如iPS细胞)，并将其分化成适当的神经系统细胞从而作为治疗用细胞。该方法中，在制造iPS细胞(重编程)、分化为神经系统细胞这两个步骤中需要得到高转换效率。此外，为了得到神经系统细胞需要耗费数月的时间，因此还具有的问题在于，在用于治疗等情况中可适用的疾病有限。

另一方面，还报告了将成纤维细胞那样的体细胞直接转换成神经系统的细胞的方法，已知通过向体细胞中导入基因而实施的方法[非专利文献1]、与化学物质一起培养体细胞的方法、组合这两者的方法。向细胞中人工导入基因的情况下，有时导入方法、其它条件对细胞内的基因表达造成影响。因此，不进行基因导入而进行由体细胞转换为神经系统细胞的方法可能是更有效的选择。

Thoma等人报告，通过在含有抑制多种激酶活性的化合物(化合物B)、转化生长因子(transforming growth factor，TGF)-β信号抑制剂和糖原合酶激酶3β(GSK3β)抑制剂的培养基中培养经作为组蛋白脱乙酰酶抑制剂的丙戊酸处理的成纤维细胞，能够获得施万细胞[非专利文献2]。此外，Cheng等人报告，通过在包含丙戊酸、TGF-β信号抑制剂、GSK3β抑制剂的培养基中在低氧条件下培养成纤维细胞，可以得到神经前体细胞[非专利文献3]。

现有技术文献

非专利文献

非专利文献1：实验医学，2012年，第30卷，189-196页

非专利文献2：Stem Cell Reports，2014年，第3卷，539-547页

非专利文献3：Cell Research，2014年，第24卷，665-679页。

发明内容

发明要解决的课题

本发明的目的在于，提供不进行人工基因导入，在短时间内从体细胞直接且高效地诱导神经系统的细胞的方法。

解决课题的手段

本发明人等对得到能够在治疗和其它用途中使用的神经系统细胞的方法反复进行深入研究的结果发现，通过在培养体细胞时抑制Smad信号和p53信号，能够以高效率诱导神经系统的细胞，从而完成本发明。

即，本发明涉及：

[1]制造神经系统细胞的方法，其包括在Smad信号和p53信号的抑制下培养体细胞的步骤；

[2][1]的方法，其中，通过转化生长因子-β信号抑制剂或骨形成蛋白信号抑制剂抑制Smad信号；

[3][1]的方法，其中，通过p53抑制剂抑制p53信号；