[发明专利]用于使用缺乏丝氨酸降解途径的基因工程微生物生产L-丝氨酸的方法

权利要求书

1.一种大肠杆菌细菌，所述细菌已经被修饰为灭活基因sdaA、sdaB、tdcG和glyA。

2.根据权利要求1所述的细菌，其中，所述细菌已经进一步被修饰为过表达3-磷酸甘油酸脱氢酶、磷酸丝氨酸磷酸酶和磷酸丝氨酸氨基转移酶。

3.根据权利要求1或2所述的细菌，其中，所述细菌表达具有在位置Y356、S357和/或S359处包含氨基酸替换的SEQ ID NO：11所示的氨基酸序列的多肽，其中位置Y356处的所述替换选自由Y356C、Y356T、Y356V、Y356S、Y356W、Y356Q、Y356G、Y356N、Y356D、Y356E、Y356F和Y356A组成的组；位置S357处的所述替换选自由S357R、S357V、S357P、S357G、S357L、S357Y、S357A、S357N、S357F和S357H组成的组；并且位置S359处的所述替换选自由S359R、S359G、S359M、S359F、S359T、S359P、S359V、S359Q、S359A、S359C、S359K、S359E和S359L组成的组。

4.根据权利要求1或2所述的细菌，其中，所述细菌包含外源核酸分子，所述外源核酸分子含有核酸序列，所述核酸序列编码具有在位置Y356、S357和/或S359处包含氨基酸替换的SEQ ID NO：11所示的氨基酸序列的多肽，其中，位置Y356处的所述替换选自由Y356C、Y356T、Y356V、Y356S、Y356W、Y356Q、Y356G、Y356N、Y356D、Y356E、Y356F和Y356A组成的组；位置S357处的所述替换选自由S357R、S357V、S357P、S357G、S357L、S357Y、S357A、S357N、S357F、S357H、S357K、S357I和S357M组成的组；并且

位置S359处的所述替换选自由S359R、S359G、S359M、S359F、S359T、S359P、S359V、S359Q、S359A、S359C、S359K、S359E和S359L组成的组。

5.根据权利要求1或2所述的细菌，其中，所述细菌已经进一步修饰为过表达基因ydeD。

6.根据权利要求1或2所述的细菌，其中，所述细菌包含选自由以下组成的组中的一种或多种基因突变：一个或多个在Irp基因内导致在编码的多肽中的氨基酸替换D143G的核苷酸替换、一个或多个在rho基因内导致在编码的多肽中的氨基酸替换R87L的核苷酸替换、一个或多个在eno基因内导致在编码的多肽中的氨基酸替换V164L的核苷酸替换和一个或多个在argP基因内导致在编码的多肽中的氨基酸替换Q132K的核苷酸替换。

7.根据权利要求1或2所述的细菌，其中，所述细菌表达以下多肽(i)至(iv)中的任一种：

(i)具有SEQ ID NO：12所示的氨基酸序列的多肽，其中在所述氨基酸序列中在位置143处D被G替换；

(ii)具有SEQ ID NO：13所示的氨基酸序列的多肽，其中在所述氨基酸序列中在位置87处R被L替换；

(iii)具有SEQ ID NO：14所示的氨基酸序列的多肽，其中在所述氨基酸序列中在位置164处V被L替换；

(iv)具有SEQ ID NO：15所示的氨基酸序列的多肽，其中在所述氨基酸序列中在位置132处Q被K替换。

8.一种用于生产L-丝氨酸或L-丝氨酸衍生物的方法，所述方法包括在培养基中培养根据权利要求1至7中任一项所述的细菌。

9.根据权利要求8所述的方法，其中，所述L-丝氨酸衍生物选自由L-半胱氨酸、L-甲硫氨酸、L-甘氨酸、O-乙酰丝氨酸、L-色氨酸、硫胺素、乙醇胺和乙二醇组成的组。