[发明专利]来自番茄的UDP‑糖基转移酶

权利要求书

1.一种包含编码多肽的重组核酸序列的重组宿主，该多肽包含：

a.SEQ ID NO:1中所示的氨基酸序列或与其具有至少约30％序列同一性的氨基酸序列；

b.SEQ ID NO:2中所示的氨基酸序列或与其具有至少约30％序列同一性的氨基酸序列；

c.SEQ ID NO:3中所示的氨基酸序列或与其具有至少约30％序列同一性的氨基酸序列；或

d.SEQ ID NO:4中所示的氨基酸序列或与其具有至少约30％序列同一性的氨基酸序列。

2.根据权利要求1所述的重组宿主，其能够产生糖基化二萜。

3.根据权利要求1或2所述的重组宿主，其包含一个或更多个重组核苷酸序列，所述重组核苷酸序列编码：

具有对映-柯巴基焦磷酸合酶活性的多肽；

具有对映-贝壳杉烯合酶活性的多肽；

具有对映-贝壳杉烯氧化酶活性的多肽；以及

具有贝壳杉烯酸13-羟化酶活性的多肽。

4.根据前述权利要求中任一项所述的重组宿主，其包含重组核酸序列，所述重组核酸序列编码具有NADPH-细胞色素p450还原酶活性的多肽。

5.根据前述权利要求中任一项所述的重组宿主，其包含编码以下中的一种或更多种的重组核酸序列：

(i)具有UGT74G1活性(UGT3活性)的多肽；

(ii)具有UGT85C2活性(UGT1活性)的多肽；以及

(iii)具有UGT76G1活性(UGT4活性)的多肽。

6.根据前述权利要求中任一项所述的重组宿主，其包含重组核酸序列，所述重组核酸序列编码具有UGT2活性的额外多肽。

7.根据前述权利要求中任一项所述的重组宿主，其中所述宿主属于以下属中的一种：酵母属(Saccharomyces)、曲霉属(Aspergillus)、毕赤酵母属(Pichia)、克鲁维酵母属(Kluyveromyces)、假丝酵母属(Candida)、汉逊酵母属(Hansenula)、腐质霉属(Humicola)、伊萨酵母属(Issatchenkia)、毛孢子菌属(Trichosporon)、酒香酵母属(Brettanomyces)、管囊酵母属(Pachysolen)、耶氏酵母属(Yarrowia)、Yamadazyma或埃希氏杆菌属(Escherichia)。

8.根据权利要求7所述的重组宿主，其中所述重组宿主是酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)细胞、解脂耶氏酵母(Yarrowia lipolitica)细胞、克鲁斯假丝酵母(Candida krusei)细胞、东方伊萨酵母(Issatchenkia orientalis)细胞或大肠杆菌(Escherichia coli)细胞。

9.根据前述权利要求中任一项所述的重组宿主，其中所述宿主产生香叶基香叶基二磷酸(GGPP)的能力被上调。

10.根据前述权利要求中任一项所述的重组宿主，其包含一个或更多个编码羟甲基戊二酰基-辅酶A还原酶、法尼基-焦磷酸合成酶和香叶基香叶基二磷酸合酶的重组核酸序列。

11.根据前述权利要求中任一项所述的重组宿主，其包含编码以下中的一种或更多种的核酸序列：

具有羟甲基戊二酰基-辅酶A还原酶活性的多肽；

具有法尼基-焦磷酸合成酶活性的多肽；

具有香叶基香叶基二磷酸合酶活性的多肽。

12.一种用于制备糖基化二萜的方法，所述方法包括在合适的发酵培养基中发酵根据权利要求2至11中任一项所述的重组宿主，并且任选地回收所述糖基化二萜。

13.根据权利要求12所述的方法，其用于制备糖基化二萜，其中所述方法以工业规模进行。

14.一种发酵液，其包含能够通过根据权利要求12或13所述的方法获得的糖基化二萜。

15.一种糖基化二萜，其通过根据权利要求12或13所述的方法获得或能够从根据权利要求14所述的发酵液获得。

16.一种组合物，其包含通过根据权利要求12或13所述方法获得或能够从根据权利要求14所述的发酵液获得的两种或更多种糖基化二萜。