[发明专利]含有螯合铁的神经干细胞用培养基

说明书

技术领域

发明的技术领域

本发明涉及含有螯合铁的神经干细胞和/或神经前体细胞用培养基、以及使用该培养基的神经干细胞和/或神经前体细胞培养方法等。

背景技术

神经干细胞是具有自我复制能力、具有多潜能性(multipotency)的未分化的细胞，是具有产生神经系统的多种细胞(神经细胞和神经前体细胞(neural progenitor)、以及胶质细胞(星型胶质细胞、少突胶质细胞等)和胶质前体细胞等)的能力的细胞。神经干细胞和神经前体细胞能提供神经细胞等通常在成体中难以增殖的细胞，因此作为再生医疗中的生物材料供给源而备受关注，期待用于针对肌萎缩性侧索硬化症、阿尔茨海默病、帕金森病等难治性神经疾病、神经损伤的治疗中。在这样的使用神经干细胞和/或神经前体细胞的针对难治性神经疾病、神经损伤的治疗、以及这类疗法的开发研究等中，需要大量的神经干细胞和/或神经前体细胞，因此离体神经干细胞和/或神经前体细胞的培养方法的开发和改良是重要的课题之一。

作为神经干细胞和/或神经前体细胞的培养方法，截至目前报道了若干种方法。

非专利文献1中，作为神经干细胞的离体培养方法，记载了神经球(neurosphere)培养。该文献公开了：通过在含有表皮细胞生长因子(EGF)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的无血清培养基中对神经干细胞进行悬浮培养，由此能够在维持神经干细胞的未分化状态、保持多潜能性的状态下使其增殖。

此外，作为对神经干细胞和/或神经前体细胞进行粘附单层培养的方法，可以列举如下方法等：在用层粘连蛋白、聚-L-鸟氨酸、纤连蛋白等基质包被的培养器上，使用含有EGF和/或bFGF的培养基培养神经干细胞和/或神经前体细胞(非专利文献2)。

就上述粘附单层培养而言，据报道神经干细胞进行对称分裂、自我复制，具有与神经球培养相比能提供均匀的细胞团的优点。

这些培养方法具有能在体外培养神经干细胞和神经前体细胞这一明显优点，但具有细胞增殖缓慢、培养中耗费时间的缺点。因此，期望开发用于在维持神经干细胞、神经前体细胞的未分化性和多潜能性的状态下促进增殖的改良的培养基和培养条件。

另外，关于含有铁结合性蛋白质的培养基，截至目前已经存在若干记载。非专利文献3报道了：对于大鼠新生仔的脑中局部SVZ内的少突胶质细胞前体细胞的增殖而言，脱铁转铁蛋白(未结合铁的转铁蛋白)是重要的。非专利文献4报道了：脱铁转铁蛋白、EGF和FGF2(bFGF)对从大鼠胚胎大脑皮质的神经球形成是重要的。进一步报道了：将胰岛素与脱铁转铁蛋白混合时，神经球的尺寸变大。此外，专利文献1公开了：在动物细胞培养用的培养基中，使用血红蛋白的重组体、片段作为转铁蛋白的替代物的方法。

但是，关于螯合铁对神经干细胞的未分化性和多潜能性的维持、增殖促进的影响则是完全未明的。

现有技术文献

专利文献

专利文献1:日本特开平6-269283号公报

非专利文献

非专利文献1:Science，1992,255(5052)，1707-10.

非专利文献2:PLoS Biology，2005，3(9)，e283

非专利文献3:ASN Neuro，2013，5(1)，e00107

非专利文献4:J Neurosci Res，2008，86(8)，1884-94

发明内容

发明要解决的课题

本发明的目的在于，提供在维持神经干细胞和/或神经前体细胞的未分化性和多潜能性的状态下促进细胞增殖的培养基，此外，提供在维持神经干细胞和/或神经前体细胞的未分化性和多潜能性的状态下促进细胞增殖的方法。进一步地，本发明的目的在于，提供由多能干细胞等诱导神经干细胞和/或神经前体细胞的培养基、以及由多能干细胞等诱导神经干细胞和/或神经前体细胞的方法。

用于解决课题的手段

本发明人为了实现上述目的反复进行了深入研究，结果发现，螯合铁在神经干细胞的未分化性和多潜能性的维持、以及增殖促进方面具有作用，由多能干细胞诱导神经干细胞和/或神经前体细胞，以至完成了本发明。

即，本发明如下所述。

[1]一种神经干细胞和/或神经前体细胞用培养基，其含有螯合铁。

[2]根据上述[1]所述的培养基，其用于促进神经干细胞和/或神经前体细胞的增殖。

[3]根据上述[1]或[2]所述的培养基，其用于维持神经干细胞和/或神经前体细胞的未分化。