[发明专利]半胱氨酸蛋白酶

权利要求书

1.一种多肽，其具有IgG半胱氨酸蛋白酶活性并包含序列SEQ ID NO：4或5的变体，所述变体：

(a)与SEQ ID NO：4或5至少50％同一；

(b)在所述变体序列中对应于SEQ ID NO：3的位置102的位置处具有半胱氨酸(C)；以及任选地

(c)在所述变体序列中对应于SEQ ID NO：3的位置92、272、294和296的位置处分别具有赖氨酸(K)、组氨酸(H)、天冬氨酸(D)和天冬氨酸(D)；

其中所述多肽在切割人IgG上比IdeZ更有效和/或所述多肽在切割人IgG上至少与IdeS一样有效。

2.根据权利要求1所述的多肽，其中，序列SEQ ID NO：4或5的所述变体：

(1)在所述变体中对应于SEQ ID NO：3的位置138的位置处具有带正电荷的氨基酸，任选地其中所述带正电荷的氨基酸是精氨酸(R)或赖氨酸(K)；和/或

(2)在所述变体中对应于SEQ ID NO：3的位置139的位置处具有带正电荷的氨基酸，任选地其中所述带正电荷的氨基酸是精氨酸(R)或赖氨酸(K)；和/或

(3)不包括连续序列DDYQRNATEA YAKEVPHQIT；和/或

(4)具有以下修饰中的至少之一：

i.在所述变体中对应于SEQ ID NO：3的位置64和65的位置处亮氨酸(L)和苏氨酸(T)残基的缺失；

ii.在所述变体中对应于SEQ ID NO：3的位置70的位置处苏氨酸(T)代替精氨酸(R)；

iii.在所述变体中对应于SEQ ID NO：3的位置71的位置处酪氨酸(Y)的缺失；

iv.在所述变体中对应于SEQ ID NO：3的位置72的位置处谷氨酰胺(Q)代替天冬酰胺(N)；

v.在所述变体中对应于SEQ ID NO：3的位置73的位置处甘氨酸(G)代替天冬酰胺(N)；

vi.在所述变体中对应于SEQ ID NO：3的位置67的位置处丙氨酸(A)代替谷氨酸(E)；

vii.在所述变体中对应于SEQ ID NO：3的位置68的位置处天冬酰胺(N)代替谷氨酰胺(Q)。

3.根据权利要求1或2所述的多肽，其中，序列SEQ ID NO：4或5的所述变体与SEQ ID NO：4或5分别至少80％、90％、95％或99％同一，和/或其中当在同一种测定中测量时所述多肽比IdeS具有更低的免疫原性并且优选地不超过IdeZ或IdeS/Z的免疫原性。

4.根据前述权利要求中任一项所述的多肽，其包含SEQ ID NO：6至25中任一者的序列或由SEQ ID NO：6至25中任一者的序列组成，任选地其中，所述序列包括在N末端的附加的甲硫氨酸和/或在C末端的组氨酸标签。

5.根据前述权利要求中任一项所述的多肽，其中，当在同一种测定中测量时，所述多肽在切割人IgG上的效力是IdeZ的至少2.0倍高。

6.根据前述权利要求中任一项所述的多肽，其比IdeS具有更低的免疫原性，其中优选地，当在同一种测定中测量时，所述多肽的免疫原性不超过IdeS的免疫原性的85％。

7.一种多核苷酸或表达载体，其包含编码前述权利要求中任一项所述的多肽的核酸序列。

8.一种宿主细胞，其包含权利要求7所述的多核苷酸或表达载体，所述宿主细胞优选地为细菌细胞，最优选地为大肠杆菌细胞。

9.一种组合物，其包含根据权利要求1至6中任一项所述的多肽和至少一种药学上可接受的载体或稀释剂。

10.一种根据权利要求1至6中任一项所述的多肽，用于人或动物体的治疗。

11.一种用于预防或治疗受试者的疾病或病症的方法，所述方法包括以预防或治疗有效量向受试者施用根据权利要求1至6中任一项所述的多肽。

12.根据权利要求11所述的方法，其中，所述疾病或病症是全部或部分地由致病性IgG抗体介导的疾病或病症，优选地其中所述疾病或病症列于表D中。

13.一种用于切割IgG的方法，所述方法包括在允许发生IgG半胱氨酸蛋白酶活性的条件下使包含IgG的样品与根据权利要求1至6中任一项所述的多肽接触。

14.根据权利要求13所述的方法，其在活体外进行和/或实施以产生Fc片段和Fab片段和/或其中所述样品是取自患有如权利要求12中所限定的疾病或病症的受试者的血液样品。