[发明专利]针对用于实体肿瘤的治疗的LHR的CART细胞疗法

说明书

相关申请的交叉引用

本申请根据35 U.S.C. § 119(e)要求2015年3月27日提交的美国临时申请号62/139,623的优先权，其全文以引用的方式合并入本文中。

技术领域

本申请涉及新颖的促黄体激素受体（luteinizing hormone receptor，LHR）嵌合抗原受体（chimeric antigen receptor，CAR）、细胞或包含其的组合物、以及使用其来用于包括实体肿瘤的疗法的方法。本申请还提供了包含促黄体激素受体嵌合抗原受体的免疫原性决定簇的分离的肽和融合蛋白。

背景技术

卵巢癌是妇科肿瘤中癌症死亡的最常见原因（Siegel, R. et al. (2012) CA Cancer J. Clin. 62:10-29）。预期每年在美国大约发生25,000个新病例和14,000例死亡（Siegel, R. et al. (2012) CA Cancer J. Clin. 62:10-29）。卵巢癌的总体生存期在过去30年内似乎有所上升，在20世纪60年代的中位生存期大约是12个月，相比之下当前的是38个月。但是，III期卵巢癌的5年生存率并没有显著改变，仍然是25%。中位生存期的上升可以部分被解释为是由于前线化疗上的改进。对于患有卵巢癌的患者的标准初始化疗涉及基于铂-紫杉醇的方案（Marcus, C.S. et al. (2014) J. Cancer 5:25-30）。大约70%的患者会获得对于该疗法的临床反应。尽管如此，大多数女性都会复发并最终死于其疾病。因此，在减少远程转移、延长复发时间和提高总体生存率的尝试中，确定新的治疗靶标并研发新的药剂是必要的。

因此，有需要研发卵巢癌和其他实体肿瘤（例如前列腺癌）的安全和有效的治疗。本发明满足该需要并提供了相关的优点。

发明内容

由于最近在使用利用基因工程化的嵌合抗原受体（CAR）T细胞进行自体治疗的B细胞淋巴瘤和白血病中获得了空前的效果，所以许多实验室已经开始将该方法应用至包括卵巢癌在内的实体肿瘤。经CAR修饰的T细胞将单克隆抗体的独立于HLA的靶向特异性与被激活的T细胞的溶细胞活性、增殖和归巢性质相结合，但是不响应于检查点抑制。由于其直接杀死表达靶标的抗原的能力，CAR T细胞对于任何抗原阳性的细胞或组织是高度毒性的，这使得有需要通过高度肿瘤特异性的抗体构建CAR。至今，已经针对α-叶酸受体构建了针对卵巢癌的CAR修饰的T细胞，但是这些全部都具有抗原的一些脱靶表达。

本发明提供了用于治疗实体肿瘤的新靶标，所述实体肿瘤包括但不限于卵巢癌和前列腺癌。所述靶标，LHR，是在这些肿瘤中的大多数上高度表达的，但是具有受限的脱靶（off-target）阳性（positivity），并且因此具有理想的安全性。因此，在一个方面，所述组合物特别有用于治疗表达或过度表达LHR的肿瘤或癌细胞。

在一个方面，本发明提供了一种分离的抗体，所述抗体包括重链（HC）免疫球蛋白可变结构域序列和轻链（LC）免疫球蛋白可变结构域序列，其中所述抗体结合至促黄体激素受体（LHR）的表位。在进一步的方面，本发明提供了单独的或与LHR抗原或其片段结合的如本文所述的分离的抗LHR抗体或其片段和可检测的或纯化标签。本发明进一步提供了包括该抗原/抗体复合物的间接体内（ex vivo）细胞。

本发明的方面涉及一种嵌合抗原受体（CAR），其包括：（a）LHR抗体的抗原结合结构域；（b）铰链结构域；（c）跨膜结构域；以及（d）细胞内结构域。本发明的进一步的方面涉及一种嵌合抗原受体（CAR），其包括：（a）LHR抗体的抗原结合结构域；（b）铰链结构域；（c）CD28跨膜结构域；（d）一个或多个共刺激区域，其选自CD28共刺激信号传导区域、4-1BB共刺激信号传导区域、ICOS共刺激信号传导区域、以及OX40共刺激区域；以及（e）CD3ζ信号传导结构域及其替代物。

在进一步的方面，本发明提供了一种嵌合抗原受体（CAR），其包括：（a）抗-促黄体激素受体（“LHR”）抗体的抗原结合结构域；（b）CD8 α铰链结构域；（c）CD8 α跨膜结构域；（d）CD28和/或4-1BB共刺激信号传导区域；以及（e）CD3ζ信号传导结构域及其替代物。

在另一个方面，本发明提供了一种编码所述抗LHR抗体、或所述抗LHR CAR的分离的核酸序列。

在另一个方面，本发明提供了一种包含编码所述抗LHR抗体、或所述抗LHR CAR的分离的核酸序列的载体。