[发明专利]用于捕获外来体的组合物和方法

说明书

用于外来体捕获的组合物和试剂盒包括特异性结合人天门冬酰胺连接的糖基化6同系物(ALG6)的抗体。该组合物和试剂盒可用在诊断受试者的疾病或状况的方法中。

本申请要求于2015年5月1日提交的美国申请第14/702,372号的优先权。上述申请的全部内容通过引用并入本文。

技术领域

本发明大体涉及用于捕获外来体的组合物，特别是抗体，用于从体液捕获外来体并检测外来体生物标志物以确定状况或诊断疾病，如传染性和/或非传染性疾病。

背景技术

外来体是直径40-100nm的小囊泡，其由多种不同的细胞型分泌，通过它们所携带的蛋白质和核糖核酸与其他细胞联系。当细胞膜片段自发地内陷并被吞噬时，在细胞内产生外来体。内部化的片段断裂成小囊泡，随后从细胞排出。在包含很多小囊泡的次级内体与细胞膜融合，引发囊泡从细胞释放时，后一阶段发生。囊泡(一旦释放即称为外来体)由脂筏构成，脂筏嵌有与原始细胞膜共有的配体。

取决于其细胞起源，外来体携带与众不同的蛋白质和/或核酸(如微小RNA(miRNAs))图谱，其能够通过与细胞质膜外来体融合引发其他细胞中的信号通路和/或转移外来体产物进入其他细胞。外来体的蛋白组成与其他细胞器(包括初级内体和质膜)的组成不同，与次级内体或多泡体(MVBs)的组成更为接近类似。

外来体在不同的生理环境中由不同的细胞型释放。例如，B淋巴细胞释放携带II类主要组织相容性复合体分子的外来体，其发挥着抗原提呈的作用。类似地，树突状细胞产生外来体(即，外来体(dexosomes)，Dex)，其在免疫应答介导中发挥作用，特别是在细胞毒T淋巴细胞刺激中发挥作用。一些肿瘤细胞以调控的方式分泌携带肿瘤抗原的特殊外来体(即，外来体(texosomes)，Tex)，其可以将这些抗原呈递给抗原提呈细胞。外来体也可以携带病原相关产物。例如，已知外来体携带源自结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis)和刚地弓形虫(Toxoplasma gondii)感染的细胞的产物。

经常使用血清或血浆测定疾病状况。例如，特异性病毒抗体的检测是对应病毒感染的假定性证据，并且典型地通过蛋白印迹法来确认。借助p24抗原测定法的HIV病毒检测或借助RT-PCR的病毒RNA检测已被用于测定循环的病毒量。此外，CD4/CD8 T细胞比率和其他免疫功能测试经常用于监测免疫状态和艾滋病的进展。最近，还开发了使用唾液或口腔上皮细胞的HIV测试法。

鉴于大范围的个体疾病以及缺乏可靠、快速和廉价的诊断测试方法，需要可靠、快速、廉价且较小介入的更有效的外来体捕获和检测方法来诊断疾病状况。

发明内容

一方面，用于外来体捕获的组合物包括特异性结合基本上由YEAQRHWQEIT(SEQ IDNO：1)的氨基酸序列组成的人α-1,3-葡糖基转移酶(ALG6)肽的抗ALG6抗体。在一个实施方式中，所述外来体捕获抗体是多克隆抗ALG6抗体。在另一个实施方式中，所述外来体捕获抗体是单克隆抗ALG6抗体。在另一个实施方式中，所述抗ALG6抗体与可检测标记或结合部分(例如生物素)缀合。在另一个实施方式中，所述组合物包括连接到固体基质(如微量滴定板)的抗ALG6抗体。

另一方面，用于捕获外来体和检测与疾病相关的生物标志物的试剂盒包括特异性结合人ALG6或其哺乳动物同系物的抗体，以及至少一种与疾病相关的生物标志物结合剂。所述试剂盒还可以包括多个孔径小于90nm的离心过滤器。所述试剂盒中的抗体可以进一步连接到固体基质上以便原位捕获外来体。此外，所述试剂盒可以包括一种或多种可检测标记，用于检测外来体中存在的一种或多种生物标志物的存在。