[发明专利]丙酰辅酶A羧化酶组合物及其用途

权利要求书

1.一种将分离的人丙酰辅酶A羧化酶(PCC)提供给有此缺乏的细胞的方法，其中所述PCC包括分离的丙酰辅酶A羧化酶α链蛋白(PCCA)和/或分离的丙酰辅酶A羧化酶β链蛋白(PCCB)中的一者或两者，PCCA包含SEQ ID NO：2的氨基酸序列，PCCB包含SEQ ID NO：4的氨基酸序列，其中所述方法包括使所述细胞与分离的人PCC的制剂在足以使所述细胞摄取治疗有效量的PCC的浓度进行接触的步骤，其中所述细胞中的PCC缺乏由此得到缓解。

2.权利要求1的方法，其中所述PCCA蛋白包含线粒体前导序列或缺少线粒体前导序列。

3.权利要求1的方法，其中所述PCCB蛋白包含线粒体前导序列或缺少线粒体前导序列。

4.权利要求1的方法，其中所述PCCA和PCCB蛋白二者均包含线粒体前导序列或均缺少线粒体前导序列。

5.权利要求1的方法，其中所述PCCA蛋白是经遗传工程改造的PCCA蛋白或其变体。

6.权利要求1的方法，其中所述PCCB蛋白是经遗传工程改造的PCCB蛋白或其变体。

7.权利要求1的方法，其中所述PCCA和PCCB蛋白二者均是经遗传工程改造的PCCA或PCCB蛋白或其变体。

8.权利要求1的方法，其中所述PCCA蛋白与一个或多个细胞穿透肽共价连接。

9.权利要求1的方法，其中所述PCCB蛋白与一个或多个细胞穿透肽共价连接。

10.权利要求1的方法，其中所述PCCA蛋白和PCCB蛋白二者均与一个或多个细胞穿透肽共价连接。

11.权利要求8、9或10的方法，其中所述细胞穿透肽是反式激活转录激活因子(TAT)或其组织特异性变体。

12.根据权利要求8-11中任一项的方法，其中所述细胞穿透肽在所述PCCA或PCCB肽翻译后化学加入。

13.根据权利要求1-12中任一项的方法，其中所述PCCA和/或PCCB蛋白是重组产生的。

14.权利要求13的方法，其中所述PCCA和/或PCCB蛋白在原核细胞或真核细胞中产生。

15.权利要求14的方法，其中所述原核细胞是大肠杆菌。

16.权利要求14的方法，其中所述真核细胞是酵母或哺乳动物细胞。

17.根据权利要求1-16中任一项的方法，其中所述PCCA蛋白与一个或多个聚乙二醇分子共价连接。

18.根据权利要求1-16中任一项的方法，其中所述PCCB蛋白与一个或多个聚乙二醇分子共价连接。

19.根据权利要求1-16中任一项的方法，其中所述PCCA蛋白和PCCB蛋白二者均与一个或多个聚乙二醇分子共价连接。

20.一种用于治疗有需要的个体的PCC缺乏的方法，包括向有需要的个体施用治疗有效量的分离的人PCC的药物组合物，其中所述分离的人PCC包含分离的丙酰辅酶A羧化酶α链蛋白(PCCA)和/或分离的丙酰辅酶A羧化酶β链蛋白(PCCB)中的一者或两者，PCCA包含SEQ ID NO：2的氨基酸序列，PCCB包含SEQ ID NO：4的氨基酸序列。

21.权利要求20的方法，其中所述PCCA蛋白包含线粒体前导序列或缺少线粒体前导序列。

22.权利要求20的方法，其中所述PCCB蛋白包含线粒体前导序列或缺少线粒体前导序列。

23.权利要求20的方法，其中所述PCCA和PCCB蛋白二者均包含线粒体前导序列或缺少线粒体前导序列。

24.权利要求20的方法，其中所述PCCA蛋白是经遗传工程改造的PCCA蛋白或其变体。

25.权利要求20的方法，其中所述PCCB蛋白是经遗传工程改造的PCCB蛋白或其变体。

26.权利要求20的方法，其中所述PCCA和PCCB蛋白二者均是经遗传工程改造的PCCA或PCCB蛋白或其变体。