[发明专利]工程改造的肉毒杆菌神经毒素

权利要求书

1.一种多肽，所述多肽包含肉毒梭菌血清型B的经修饰的受体结合结构域（B-H_C），其中，与如SEQ ID NO：5所示的肉毒梭菌血清型B菌株1的野生型对应体相比，所述经修饰的受体结合结构域的修饰为双重氨基酸取代；所述氨基酸取代位于W1178位置和E1191位置处，其中：

所述位于W1178位置处的取代为W1178Q，以及

所述位于E1191位置处的取代选自于由E1191M、E1191C和E1191V所组成的组，

其中，所述多肽的特征在于，与从所述野生型对应体观察到的相比，所述多肽与人SytII的结合增强。

2.根据权利要求1所述的多肽，其中，与如SEQ ID NO：5所示的肉毒梭菌血清型B菌株1的野生型对应体相比，所述肉毒梭菌血清型B的经修饰的受体结合结构域（B-H_C）进一步包含一个或多个另外的氨基酸取代，所述一个或多个另外的氨基酸取代选自于由以下所组成的组：

S1199W、S1199E和S1199H。

3.一种肉毒杆菌神经毒素(BoNT)多肽，其包含：

a) 蛋白酶结构域；

b) 蛋白酶裂解位点；

c) 移位结构域；和

d) 肉毒梭菌血清型B的经修饰的受体结合结构域(B-H_c)，其中，与如SEQ ID NO：5所示的肉毒杆菌血清型B菌株1的野生型对应体相比，所述经修饰的受体结合结构域的修饰为双重氨基酸取代；所述氨基酸取代位于W1178位置和E1191位置处，其中：

所述位于W1178位置处的取代为W1178Q，以及

所述位于E1191位置处的取代选自于由E1191M、E1191C和E1191V所组成的组，

其中，所述BoNT多肽的特征在于，与从所述野生型对应体观察到的相比，所述BoNT多肽与人Syt II的结合增强。

4.根据权利要求3所述的BoNT多肽，其中，与如SEQ ID NO：5所示的肉毒梭菌血清型B菌株1的野生型对应体相比，所述肉毒梭菌血清型B的经修饰的受体结合结构域（B-H_C）进一步包含一个或多个另外的氨基酸取代，所述一个或多个另外的氨基酸取代选自于由以下所组成的组：

S1199W、S1199E和S1199H。

5.根据权利要求4所述的BoNT多肽，其中所述蛋白酶结构域、移位结构域和蛋白酶裂解位点来自选自于由A、B、C、D、E、F、G及其组合所组成的组中的血清型。

6.根据权利要求4所述的BoNT多肽，其中所述蛋白酶结构域、移位结构域和蛋白酶裂解位点来自如SEQ ID NO：5所示的血清型B菌株1或如SEQ ID NO：4所示的血清型A菌株1。

7.根据权利要求1或2所述的多肽或根据权利要求3-6中任一项所述的BoNT多肽，其中：

所述经修饰的受体结合结构域对应于SEQ ID NO: 5的残基1078-1291或SEQ ID NO: 5的残基859-1291。

8.一种嵌合分子，其包含第一部分，所述第一部分是连接至第二部分的肉毒梭菌血清型B的经修饰的受体结合结构域(B-H_c)，其中，与如SEQ ID NO：5所示的肉毒梭菌血清型B菌株1的野生型对应体相比，所述经修饰的受体结合结构域的修饰为双重氨基酸取代；所述氨基酸取代位于W1178位置和E1191位置处，其中：

所述位于W1178位置处的取代为W1178Q，以及

所述位于E1191位置处的取代选自于由E1191M、E1191C和E1191V所组成的组，

其中，所述嵌合分子的特征在于，与从所述野生型对应体观察到的相比，所述嵌合分子与人Syt II的结合增强，

其中，所述第二部分选自于由小分子、核酸和蛋白质所组成的组。