[发明专利]使用扩增测定细胞

权利要求书

1.一种方法，其包括：

将细胞包封在多个微流体液滴内；

裂解所述多个液滴内的至少一些细胞以将核酸从所述细胞释放至所述液滴的内部；

在所述液滴的内部，施加能够选择性扩增怀疑存在于从所述细胞释放的核酸内的靶核酸序列的条件；

将液滴的内部合并在一起以形成组合流体；和

测定包含在组合流体中的扩增核酸。

2.权利要求1的方法，其中所述细胞包含人细胞。

3.权利要求1或2中任一项的方法，其中所述细胞包含癌细胞。

4.权利要求1-3中任一项的方法，其中所述细胞包含白血病细胞。

5.权利要求1-4中任一项的方法，其中所述细胞包含血细胞。

6.权利要求1-5中任一项的方法，其中所述细胞取自活组织检查样品。

7.权利要求1-6中任一项的方法，其中所述细胞包含细菌。

8.权利要求1-7中任一项的方法，其中所述细胞包含疑似引起疾病的细胞。

9.权利要求1-8中任一项的方法，其中所述靶核酸序列是DNA序列。

10.权利要求1-8中任一项的方法，其中所述靶核酸序列是RNA序列。

11.权利要求1-8或10中任一项的方法，其中所述靶核酸序列是mRNA序列。

12.权利要求1-11中任一项的方法，其中施加能够选择性扩增靶核酸序列的条件包括施加能够通过PCR引起扩增的条件。

13.权利要求12的方法，其中施加能够选择性扩增靶核酸序列的条件包括施加能够通过RT-PCR引起扩增的条件。

14.权利要求1-13中任一项的方法，其中施加能够选择性扩增靶核酸序列的条件包括使用PCR扩增所述靶核酸序列。

15.权利要求1-14中任一项的方法，其中施加能够选择性扩增靶核酸序列的条件包括向所述液滴的至少部分内部添加聚合酶。

16.权利要求15的方法，其包括通过注射将聚合酶添加至所述液滴的至少部分内部。

17.权利要求15或16中任一项的方法，其中所述聚合酶包含Taq聚合酶。

18.权利要求1-17中任一项的方法，其中所述多个液滴中的至少一些包含聚合酶。

19.权利要求1-18中任一项的方法，其中所述多个液滴中的至少一些包含Taq聚合酶。

20.权利要求1-19中任一项的方法，其中施加能够选择性扩增靶核酸序列的条件包括将所述微流体液滴中的至少一些暴露于至少约50℃的温度。

21.权利要求1-20中任一项的方法，其中施加能够选择性扩增靶核酸序列的条件包括将所述微流体液滴中的至少一些暴露于至少约90℃的温度。

22.权利要求1-21中任一项的方法，其中施加能够选择性扩增靶核酸序列的条件包括向所述液滴的至少部分内部添加脱氧核糖核苷酸。

23.权利要求22所述的方法，其包括通过注射向所述液滴的至少部分内部添加脱氧核糖核苷酸。

24.权利要求1-23中任一项的方法，其中所述多个液滴中的至少一些包含脱氧核糖核苷酸。

25.权利要求1-24中任一项的方法，其中所述多个液滴中的至少一些包含引物。

26.权利要求1-25中任一项的方法，其中施加能够选择性扩增靶核酸序列的条件包括向所述液滴的至少部分内部添加引物。

27.权利要求26的方法，其包括通过注射向所述液滴的至少部分内部添加所述引物。

28.权利要求26或27中任一项的方法，其中所述引物包含人引物。

29.权利要求26-28中任一项的方法，其中所述引物包含细菌引物。

30.权利要求26-29中任一项的方法，其中所述引物包含非特异性细菌引物。