[发明专利]血红素蛋白保存液和血红素蛋白稳定化方法

说明书

本发明的目的在于提供一种有效阻止血红素蛋白变性或降解的新的血红素蛋白保存液和血红素蛋白稳定化方法，具体涉及含有二磺酸或其盐的血红素蛋白保存液以及使二磺酸或其盐共存于含血红素蛋白的样品中的血红素蛋白稳定化方法。

技术领域

本发明涉及血红素蛋白(ヘムタンパク質)保存液和血红素蛋白稳定化方法。尤其涉及在免疫测定法中有用的血红素蛋白保存液和血红素蛋白稳定化方法。

背景技术

近年来，随着癌症发病率不断增加，作为大肠癌体检的初次检查和下消化道疾病的筛查法，检测粪便中血液的便潜血检查也广泛开展。便潜血检查通过基于利用作为血红素蛋白的血红蛋白(ヘモグロビン)所具有的过氧化物酶活性的化学显色反应的化学测定法和利用对人血红蛋白有特异性的抗体的免疫测定法来进行，尤其是，免疫测定法与化学测定法相比，无需在检查前限制进餐和限制服药，可简便快速地进行测定，因此是公认的便潜血检查的主要检查方法。

但是，已知血红蛋白在溶液中非常不稳定，容易变性或降解。这种变性或降解，使血红蛋白的立体结构遭到破坏，其抗原性降低，因此在血红蛋白的免疫测定法中会导致错误的测定结果。作为血红蛋白变性或降解的原因，列举有保存温度上升、时间推移、细菌及酶等各种因素，例如，关于保存温度，已知溶液中的血红蛋白在冷冻或冷藏状态下较为稳定，但在室温或室温以上的温度下会发生变性或降解。

尤其是，在便潜血检查中，多为受试者自己在自家等采集粪便，在含有粪便检体用稀释液的密闭容器中将粪便悬浮用于检查，这种情况下，粪便中的血红蛋白可能会在溶液中放置数日，因利用邮递等运送方式而置于高温下。而且，在医院和检查机构会进行多个检体和其他项目的检查，因此在得出测定结果前可能需要很长时间。因此，在便潜血检查中，温度上升和时间推移等原因相互叠加，导致血红蛋白容易发生变性或降解。

而且，在便潜血检查中，经常使用能够准确且快速地测定多个检体的自动分析装置进行测定。使用自动分析装置的测定中，试剂和装置的变化会影响检查结果的精度，因此使用含有已知血红蛋白浓度的标准样品和含有已知血红蛋白浓度的对照样品定期进行自动分析装置的校准和精度管理。关于校准，是通过自动分析装置测定含有多种已知浓度的测定对象物质的标准试剂，绘制标准曲线，进行自动分析装置的校准；关于精度管理，是通过自动分析装置测定含有已知测定对象物质浓度的对照试剂，根据测定值是否处于规定范围内来判定分析精度。但是，如果标准试剂和对照试剂中所含有的血红蛋白发生变性或降解，则无法准确地进行校准和精度管理，导致测定出现错误。

因此，为了抑制血红蛋白变性或降解，得到准确的测定结果，至今提出有各种用于使血红蛋白稳定的方法。例如，提出有添加硫柳汞和双氯苯双胍己烷等抗微生物剂的方法(例如参考专利文献1)、添加除人以外的动物血红蛋白的方法(例如参考专利文献2)、添加除人以外的动物血清的方法(例如参考专利文献3)、添加糖苷酶型溶菌酶的方法(例如参考专利文献4)、添加亚硫酸及二亚硫酸等的方法(例如参考专利文献5)、添加酰基精氨酸酯和阳离子型表面活性剂的方法(例如参考专利文献6)、添加乙醛酸的方法(例如参考专利文献7)等。

而且，本申请人已经提出了添加亚铁氰化物等水溶性过渡金属配合物的方法(例如参考专利文献8、专利文献9)、添加血红蛋白酶解产物的方法(例如参考专利文献10)、添加过渡金属类的方法(例如参考专利文献11)、添加苹果酸等有机酸的方法(例如参考专利文献12)、添加脱脂白蛋白的方法(例如参考专利文献13)、添加亚氨羧酸的方法(例如参考专利文献14)等。

但是，由于血红蛋白非常不稳定，因此即使是这些血红蛋白稳定化方法，也存在无法充分防止其变性或降解的问题。

现有技术文献

专利文献

专利文献1：日本特开昭63-271160号公报

专利文献2：日本特开平2-296149号公报

专利文献3：日本特开平4-145366号公报