[发明专利]用于检测抗CD3同二聚体的基于细胞的测定

权利要求书

1.一种用于检测包含T细胞依赖性双特异性抗体(TDB)的组合物中抗CD3同二聚体的方法，其中所述双特异性抗体包含靶抗原结合片段和CD3结合片段，所述方法包括

使T细胞群体与所述组合物接触，其中所述T细胞包含编码可操作地连接至响应于T细胞活化的响应元件的报告基因的核酸，并且其中所述T细胞群体不包含所述靶抗原，

其中所述报告基因的表达指示存在抗CD3同二聚体。

2.如权利要求1所述的方法，其中所述报告基因是萤光素酶、荧光蛋白、碱性磷酸酶、β内酰胺酶或β半乳糖苷酶。

3.如权利要求2所述的方法，其中所述萤光素酶是萤火虫萤光素酶、海肾荧光素酶或纳米荧光素酶。

4.如权利要求1所述的方法，其中所述响应于T细胞活化的响应元件是NFAT启动子、AP-1启动子、NFκB启动子、FOXO启动子、STAT3启动子、STAT5启动子或IRF启动子。

5.如权利要求2所述的方法，其中所述响应于T细胞活化的响应元件是NFAT启动子、AP-1启动子、NFκB启动子、FOXO启动子、STAT3启动子、STAT5启动子或IRF启动子。

6.如权利要求3所述的方法，其中所述响应于T细胞活化的响应元件是NFAT启动子、AP-1启动子、NFκB启动子、FOXO启动子、STAT3启动子、STAT5启动子或IRF启动子。

7.如权利要求4所述的方法，其中所述响应于T细胞活化的响应元件包括来自NFAT、AP-1、NFκB、FOXO、STAT3、STAT5和IRF中任何一者或多者的T细胞活化响应元件。

8.如权利要求5所述的方法，其中所述响应于T细胞活化的响应元件包括来自NFAT、AP-1、NFκB、FOXO、STAT3、STAT5和IRF中任何一者或多者的T细胞活化响应元件。

9.如权利要求6所述的方法，其中所述响应于T细胞活化的响应元件包括来自NFAT、AP-1、NFκB、FOXO、STAT3、STAT5和IRF中任何一者或多者的T细胞活化响应元件。

10.如权利要求1-9中任一项所述的方法，其中所述T细胞群体是CD4⁺ T细胞或CD8⁺ T细胞的群体。

11.如权利要求1-9中任一项所述的方法，其中所述T细胞群体是Jurkat T细胞或CTLL-2 T细胞的群体。

12.如权利要求1-9中任一项所述的方法，其中T细胞群体与包含浓度范围为0.01 ng/mL至50 ng/mL的所述双特异性抗体的组合物接触。

13.如权利要求10所述的方法，其中T细胞群体与包含浓度范围为0.01 ng/mL至50 ng/mL的所述双特异性抗体的组合物接触。

14.如权利要求11所述的方法，其中T细胞群体与包含浓度范围为0.01 ng/mL至50 ng/mL的所述双特异性抗体的组合物接触。

15.如权利要求1-9中任一项所述的方法，其中所述报告基因在使所述细胞与所述组合物接触后1、2、3、4、5、6、7、8、12、16、20或24小时中的任何一者或多者之后检测。

16.如权利要求10所述的方法，其中所述报告基因在使所述细胞与所述组合物接触后1、2、3、4、5、6、7、8、12、16、20或24小时中的任何一者或多者之后检测。