[发明专利]抗磷脂酰肌醇蛋白聚糖-3抗体和其用于诊断与治疗癌症的用途

说明书

本发明涉及抗GPC3抗体和其应用。本发明研究抗GPC3抗体对肿瘤生长、增殖、迁移的潜在抑制性影响和其诊断性与治疗性目的的应用。

技术领域

本发明涉及用于诊断与治疗癌症的抗体。确切地说，本发明涉及抗磷脂酰肌醇蛋白聚糖-3(glypican-3；GPC3)抗体和其在癌症治疗中的用途。

背景技术

磷脂酰肌醇蛋白聚糖-3(GPC3)为一种高度表达于HCC和一些其它人类癌症(包括黑素瘤)中的细胞表面蛋白。GPC3基因编码具有580种氨基酸的70-kDa前体核心蛋白，所述前体核心蛋白可通过弗林蛋白酶(furin)裂解生成40-kDa氨基(N)末端蛋白和30-kDa膜结合羧基(C)末端蛋白，所述蛋白具有两个硫酸乙酰肝素(HS)聚糖链。已在哺乳动物中鉴别出六种磷脂酰肌醇蛋白聚糖(GPC1-6)。所有磷脂酰肌醇蛋白聚糖均具有特征性结构。这些共同特征表明磷脂酰肌醇蛋白聚糖可具有相似三维(3D)结构。

还在HCC细胞中发现GPC3与FGF-2之间的相互作用(绿川,Y.(Midorikawa,Y.)等人,(2003).国际癌症杂志(International journal of cancer Journal internationaldu cancer)103,455-465)。曾假设认为缺乏GPI锚定域的突变GPC3可阻断Wnt信号传导并且抑制Wnt依赖性肿瘤的生长。然而，我们无法排除可因其它因子(如通过HS链调节的肝素结合生长因子)的活性所致而抑制HCC生长的可能性。肝细胞癌(HCC)与胆管癌(CCA)为原发性肝癌的两种主要形式。越来越多的证据支持GPC3为针对HCC的新型肿瘤标记。GPC3高度表达于HCC细胞系、HepG2、Hep3B、HT17、HuH6、HuH7和PLC/PRF中(宋,H.H.(Song,H.H.)等人,(2005).生物化学杂志(The Journal of biological chemistry)280,2116-2125)。此外，GPC3高度表达于HCC中(胡,H.C.(Hsu,H.C.),程,W.(Cheng,W.)和赖,P.L.(Lai,P.L.)(1997).癌症研究(Cancer research)57,5179-5184)而并非CCA或正常肝脏组织中。GPC3还以较小程度表达于黑素瘤(中冢,T.(Nakatsura,T.)等人,(2004a).临床癌症研究：美国癌症研究协会官方杂志(Clinical cancer research:an official journal of theAmerican Association for Cancer Research)10,6612-6621)、卵巢透明细胞癌(斯塔德尔曼,S.(Stadlmann,S.),居特(Gueth)等人,(2007).临床癌症研究：国际妇科病理学家协会官方杂志(Clinical cancer research:an official journal of the InternationalSociety of Gynecological Pathologists)26,341-344)、卵黄囊肿瘤(辛格,D.L(Zynger,D.L)等人,(2006).美国外科病理学杂志(The American journal of surgicalpathology)30,1570-1575)、神经母细胞瘤、肝母细胞瘤、威尔姆斯氏肿瘤细胞(Wilms'tumor cell)和其它肿瘤中(鲍胡尔,D.(Baumhoer,D.),托尼罗(Tornillo)等人,(2008).美国临床病理学杂志(American journal of clinical pathology)129,899-906；赛卡利,Z.(Saikali,Z.)和辛奈特,D.(Sinnett,D.)(2000).国际癌症杂志(International journalof cancer Journal international du cancer)89,418-422)。另一方面，GPC3沉默于乳癌、间皮瘤、上皮卵巢癌和肺腺癌中。当使用抗人类GPC3(残基303-464)而产生的兔多克隆抗体时，在大于70％的HCC肿瘤而非正常肝脏组织中发现GPC3蛋白表达(中冢,T.(Nakatsura,T.)等人,(2003).生物化学与生物物理研究通讯(Biochemical andbiophysical research communications)306,16-25)。由于发现GPC3阳性HCC患者的存活率比GPC3阴性HCC患者明显低5年，因此GPC3表达与HCC中的不良预后相关(白川,H.(Shirakawa,H.)等人(2009).癌症科学(Cancer science)100,1403-1407)。由于GPC3显示出在HCC中的高表达，因此其具有作为肿瘤特异性疗法的有前景目标的可能性。此外，因为可在一些患有GPC3阳性癌症的患者的血液中检测到少量GPC3(卡普罗,M.(Capurro,M.)等人,(2003).胃肠病学(Gastroenterology)125,89-97；黑波,Y.(Hippo,Y.)等人,(2004).癌症研究(Cancer research)64,2418-2423)，因此测量血液中的GPC3可作为追踪这些患者的病程的适用性诊断。