[发明专利]减少或预防由内皮细胞的机械刺激所致的内膜损伤的方法

说明书

本公开内容的实施方式涵盖用于改善或预防由内皮细胞的机械刺激造成的内膜损伤的方法和/或组合物。所述损伤可能由个体动脉、静脉或毛细血管中装置的使用而造成，例如用以移出血管中血栓、栓塞或动脉粥样硬化斑块的装置的使用。治疗和预防实施方式涉及治疗有效量的SUR1‑TRPM4通道的一种或多种拮抗剂，SUR1‑TRPM4通道在机械刺激后上调。

本申请要求2015年5月29日提交的美国临时申请号62/168,589的优先权，其通过引用全文纳入本文。

技术领域

本公开内容的实施方式至少涉及细胞生物学、分子生物学和医药领域。

背景技术

本公开内容通过提供减少或预防个体在其内皮细胞经历机械刺激之后出现血管内膜损伤的方法，解决了本领域长久未决的需求。

概述

本公开内容的实施方式中，受机械刺激的内皮细胞中的SUR1-TRPM4通道(也可称为NC_Ca-ATP通道)上调。所述上调可能会导致受影响的细胞、组织和/或器官中的有害生理作用，因此，本公开内容提供用以避免此类现象的方法或治疗由此类现象直接或间接导致的医疗状况的方法。在具体实施方式中，所述通道的一种或多种拮抗剂阻止一种或多种通道组分的上调，或减少一种或多种通道组分的上调。

可采用作用于磺酰脲类受体1(SUR1)和/或瞬时受体电位阳离子通道，亚家族M，成员4(TRPM4)的化合物来预防和/或减少和/或治疗由内皮细胞的机械刺激直接或间接造成的内膜损伤。此类机械刺激可能会在任何血管内操作，例如导管血管造影术、机械血栓切除术、动脉瘤腔内修复术等的过程中(和/或之后)发生。

附图的简要说明

图1A、1B和1C。内皮细胞的机械刺激会造成NFκB活化和TRPM4的上调。内皮细胞在带有柔性底部的培养皿中培养，然后通过对所述培养皿的底侧吹气来对细胞进行机械刺激。图1A和1C：在对照条件下(图1A，左图)和在机械刺激后5分钟(图1A，右图)，免疫荧光标记NF-κB亚基、p65，并用DAPI核染色(蓝色)，显示p65的显著核转运；定量显示约80％的细胞中p65核转运的强力增加(图1C，左)；**，P0.01。图1B和1C：在机械刺激后6小时免疫荧光标记内皮细胞的TRPM4显示TRPM4的显著上调(图1B)，以及TRPM4表达型细胞的数量的6倍增加(图1C，右)；**，P0.01。这些数据与通过机械敏感性的转录因子NF-κB的活化造成通道亚基转录上调的机械刺激相符。

图2A和2B。内皮细胞的机械刺激会造成功能性SUR1-TRPM4通道的上调。内皮细胞在带有柔性底部的培养皿中培养，然后通过对所述培养皿的底侧吹气来对细胞进行机械刺激。图2A：膜片箝记录显示功能性SUR1-TRPM4通道电流，其具有下列特征性特点：(i)由Cs+离子携带的通道电流；(ii)由ATP消耗(采用叠氮化钠加2-脱氧葡萄糖)诱导的通道开口；(iii)由N-甲基-D-葡糖胺(NMDG)所致的通道阻塞。图2B：在机械活化前的对照条件下(CTR)；机械活化后(STR)；机械活化后，在NF-κB抑制剂、吡咯烷二硫氨基甲酸盐(PDTC)(作为阴性对照)的存在下；和无机械活化，在肿瘤坏死因子α(TNFα)(作为阳性对照)的存在下，于–50mV检测的SUR1-TRPM4通道电流的幅度。这些数据证实了机械敏感性的转录因子，NF-κB，在SUR1-TRPM4通道上调中的至关重要的作用。

具体实施方式

示例性定义

术语“一种”或“一个”当与“包含”在权利要求和说明书中联用时，可表示“一个”，但也与“一个或多个”，“至少一个”和“一个或多于一个”的意思一致。在权利要求中使用术语“或”表示“和/或”，除非特别指出仅替代方式，或替代方式互相排除，但公开内容支持仅指替代方式和“和/或”的定义。