[发明专利]谷氨酸草酰乙酸转氨酶1(GOT1)、制剂和产生它们的方法及其用途

权利要求书

1. 一种包含谷氨酸草酰乙酸转氨酶1 (GOT1)多肽分子的蛋白制剂，其中100%的GOT1多肽分子在GOT1多肽的第1位具有丙氨酸，并且GOT1多肽分子构成制剂中至少95%的蛋白。

2.权利要求1的蛋白制剂，其中蛋白构成制剂中至少98%的分子。

3.一种药物组合物，其包含权利要求1或2的蛋白制剂作为活性剂和药学上可接受的载体。

4. 权利要求1或3的制剂或药物组合物，其中所述GOT1包含与SEQ ID NO: 2具有至少90%同源性的氨基酸序列。

5. 权利要求1或3的制剂或药物组合物，其中所述GOT1由SEQ ID NO: 2所示的氨基酸序列组成。

6.一种包含目标多肽和小泛素相关修饰物(SUMO)的融合蛋白，其中所述目标多肽的N末端翻译融合至所述SUMO的C末端，所述融合蛋白缺少异源亲和标签。

7. 一种包含谷氨酸草酰乙酸转氨酶1 (GOT1)和小泛素相关修饰物(SUMO)的GOT1融合蛋白，其中所述GOT1的N末端翻译融合至所述SUMO的C末端，所述融合蛋白缺少亲和标签。

8.权利要求7的融合蛋白，其中所述GOT1在第1位包含丙氨酸。

9.权利要求6或7的融合蛋白，其中所述亲和标签为多聚组氨酸标签。

10. 权利要求7的融合蛋白，其中所述GOT1的氨基酸序列与SEQ ID NO: 2具有至少90%同源性。

11. 权利要求6或7的融合蛋白，其中所述SUMO的氨基酸序列与SEQ ID NO: 5具有至少90%同源性。

12. 权利要求7的融合蛋白，其包含与SEQ ID NO: 1具有至少90%同源性的氨基酸序列。

13. 权利要求7的融合蛋白，其由SEQ ID NO: 1所示的氨基酸序列组成。

14.权利要求6或7的融合蛋白，其中所述SUMO为酵母SUMO。

15. 权利要求14的融合蛋白，其中所述酵母SUMO为酿酒酵母的mif two 3抑制因子(Smt3)。

16.一种分离的多核苷酸，其编码权利要求6-15中任一项的融合蛋白。

17. 权利要求16的分离的多核苷酸，其包含与SEQ ID NO: 3具有至少90%同源性的核酸序列。

18.一种核酸构建体，其包含权利要求16或17中任一项的分离的多核苷酸。

19.一种在有需要的受试者中治疗与谷氨酸过多有关的疾病或病况的方法，所述方法包括给予受试者治疗有效量的权利要求1-5中任一项的制剂或药物组合物，从而治疗所述疾病或病况。

20.权利要求1的蛋白制剂，其用于治疗与谷氨酸过多有关的疾病或病况。

21.权利要求3的药物组合物，其用于治疗与谷氨酸过多有关的疾病或病况。

22.权利要求19-21中任一项的方法、制剂或组合物，其中所述疾病或病况为脑疾病或病况。

23.权利要求19-21中任一项的方法、制剂或组合物，其中所述脑疾病为中枢神经系统的癌症。

24.权利要求23的方法、制剂或组合物，其中所述癌症为胶质母细胞瘤。

25.权利要求22的方法、制剂或组合物，其中所述脑病况为脑缺血。

26.权利要求19-21中任一项的方法、制剂或组合物，其中所述疾病为神经退行性疾病。

27.一种纯化多肽的方法，所述方法包括：

(a) 在宿主细胞内表达包含所述多肽和SUMO的融合蛋白，其中所述多肽的N末端翻译融合至所述SUMO的C末端，所述融合蛋白缺少异源亲和标签；

(b) 自所述融合蛋白去除所述SUMO；和

(c) 自所述宿主细胞分离所述多肽，从而纯化多肽。

28.权利要求27的方法，其中步骤(b)先于步骤(c)实现。