[发明专利]6’-SL、LNnT和LST c的三元混合物

说明书

一种基本上由6’‑SL、LNnT和LSTc组成的人乳低聚糖的混合物，其通过在α2,6‑转唾液酸酶的存在下对6’‑SL和LNnT进行处理而制得。

技术领域

本发明涉及人乳低聚糖(HMO)的三元混合物，特别是6’-O-唾液酸基乳糖(6’-SL)、乳-N-新四糖(LNnT)和唾液酸基乳-N-四糖c(LST c)的混合物，用于制备该三元混合物的方法，以及该三元混合物在人类健康中的应用。

背景技术

HMO已经成为近年来极为关注的课题，因为其在人类机体中发生的许多生物学过程中发挥作用。哺乳动物乳汁包含这些复杂的低聚糖中的至少130种(Urashima等人:MilkOligosaccharides,Nova Biomedical Books,New York,2011,ISBN:978-1-61122-831-1)。

此前，HMO的唯一来源是主要包含水、以及55-70g/l乳糖、24-59g/l脂质、约13g/l蛋白质、5-15g/l HMO和约1.5g/l矿物质的哺乳动物乳汁。

然而，在过去十年中，开发用于合成这些低聚糖的方法的努力显著增加，因为其在许多人生物学过程中发挥作用。在这方面，已经开发出通过微生物发酵、酶法、化学合成或这些技术的组合来制备HMO的方法。例如，通过化学方法，可如WO 2011/100980和WO 2013/044928中所述制备LNnT，可如WO 2012/155916和WO 2013/044928中所述合成LNT，可如WO2013/091660中所述制备LNT和LNnT的混合物，可如WO 2010/115934和WO 2010/115935中所述制备2’-FL，可如WO2013/139344中所述制备3-FL，且可如WO 2010/100979中所述制备6’-SL及其盐。作为生物技术方法的实例，WO 01/04341和WO2007/101862描述了如何使用基因改造的大肠杆菌(E.coli)制备任选由岩藻糖或唾液酸取代的核心人乳低聚糖。作为酶法的一个实例，可如EP-A-577580中所述制备唾液酸化低聚糖。

还已经致力于开发用于酶法合成HMO低聚糖的混合物，而不必如WO 2012/156897和WO 2012/156898中所述合成混合物的所有低聚糖组分的方法。这些方法已经提供了包含多种不同低聚糖的反应混合物。

然而，仍在寻求更好的用于合成HMO的混合物的方法。

有证据表明，人消化道中称为微生物组(microbiome)的微生物的定居群落在健康和疾病中起着重要作用。当微生物组的正常组成失去平衡时，人宿主可能会遭受后果。最近的研究涉及到例如癌症、肥胖、炎性肠病、银屑病、哮喘、以及甚至可能是自闭症的多种疾病中的微生物组的失衡。据信HMO积极地调节微生物组，并且将它们用于此目的越来越感兴趣。然而，HMO的显著多样性，加上缺乏可得性，已经阻碍对各个HMO的特定功能的研究。明确需要特定的HMO或HMO的组合从而以期望的方式调节微生物组，以便解决特定的人健康问题。

发明内容

本发明的第一方面涉及一种基本上由6’-O-唾液酸基乳糖(6’-SL)、乳-N-新四糖(LNnT)和唾液酸基乳-N-四糖c(LST c)组成的HMO的第一混合物。有利的是，在该第一HMO混合物中，LST c相对于(6’-SL+LNnT)的摩尔比为至少1：18，有利地为至少1：8，更有利地为至少1：5，甚至更有利地为至少1：3。同样有利的是，在第一混合物中，6’-SL相对于LNnT的摩尔比为0.18-5.5，更有利地为0.3-3，还更有利地为约1。