[发明专利]生物催化氧化

权利要求书

1.在需氧条件下氧化至少一种有机物质以生产至少一种醇、胺、酸、醛、鼠李糖脂和/或酮的方法，所述方法包括：

（a）在需氧条件下从碳源生产乙醇和/或乙酸，包括

（i）使所述碳源与反应混合物接触，所述反应混合物包含

- 处于指数生长期的第一产乙酸微生物；

- 游离氧；和

- 处于稳定期的第二产乙酸微生物

其中第一和第二产乙酸微生物能够将碳源转化为乙酸和/或乙醇；和

（b）使来自步骤（a）的乙酸和/或乙醇与所述有机物质和能够氧化所述有机物质的第三微生物接触以生产醇、胺、酸、醛、鼠李糖脂和/或酮，且

其中所述乙酸是维持培养基或细胞溶胶中的NAD+/NADH、NADP+/NADPH和/或FAD+/FADH的比的辅底物，

其中所述需氧条件是气相中氧浓度为0.000005-1体积％的结果。

2.根据权利要求1的方法，其中有机物质选自支链或无支链、饱和或不饱和、任选取代的烷、烯、炔、醇、醛、酮、羧酸、羧酸酯、胺和环氧化物。

3.根据权利要求1或2的方法，其中在步骤（b）中乙酸浓度为至少10ppm。

4.根据权利要求3的方法，其中在步骤（b）中乙酸浓度为100ppm。

5.根据权利要求1或2的方法，其中所述有机物质是：

（a）在步骤（b）中氧化以形成相应醇的烷；

（b）在步骤（b）中氧化以形成相应的胺、酸、醛和/或酮的醇；

（c）在步骤（b）中氧化以形成乙酸的丙酮酸；

（d）在步骤（b）中氧化以形成相应的烯或鼠李糖脂的羧酸；和/或

（e）在步骤（b）中氧化以形成相应的羧酸的醛。

6.根据权利要求中1或2的方法，其中所述第三微生物被基因修饰以相对于野生型细胞增加至少一种氧化酶的表达，其中所述氧化酶选自烷单加氧酶、二甲苯单加氧酶、醛脱氢酶、醇氧化酶和醇脱氢酶。

7.根据权利要求6的方法，其中，

（a）烷单加氧酶是细胞色素-P450单加氧酶；

（b）烷单加氧酶是由来自至少一种革兰氏阴性细菌的alkB基因编码的alkB基因产物；和/或

（c）醇脱氢酶是由来自至少一种革兰氏阴性细菌的alkJ基因编码的醇脱氢酶。

8.根据权利要求7的方法，其中所述革兰氏阴性细菌选自假单胞菌（Pseudomonads）、固氮菌属（Azotobacter）、脱亚硫酸菌属（Desulfitobacterium）、伯克霍尔德氏菌属（Burkholderia）、黄单胞菌属（Xanthomonas）、红细菌属（Rhodobacter）、雷尔氏菌属（Ralstonia）、戴尔福特菌属（Delftia）、立克次氏体属（Rickettsia）、Oceanicaulis、柄杆菌属（Caulobacter）、海杆菌属（Marinobacter）和红假单胞菌属（Rhodopseudomonas）。