[发明专利]用于检测靶核酸的方法和试剂盒在审
| 申请号： | 201680036242.3 | 申请日： | 2016-05-17 |
| 公开（公告）号： | CN107810274A | 公开（公告）日： | 2018-03-16 |
| 发明（设计）人： | 朴荣石 | 申请（专利权）人： | 和平基因生物有限公司;朴荣石 |
| 主分类号： | C12Q1/6813 | 分类号： | C12Q1/6813 |
| 代理公司： | 北京坤瑞律师事务所11494 | 代理人： | 陈桉 |
| 地址： | 韩国*** | 国省代码： | 暂无信息 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 用于 检测 核酸 方法 试剂盒 | ||
1.一种用于检测靶核酸的方法，其包括以下步骤：
(a)通过使包含靶核酸的样品与引物反应而扩增靶核酸，所述引物包含(i)与靶核酸互补的结合区和(ii)包含与靶核酸非互补的核苷酸的核酸寡聚体，以及(iii)带有标记的引物；
(b)使步骤(a)中扩增的产物与膜反应，所述膜具有固定于其上的与所述核酸寡聚体互补结合的探针；以及
(c)确认反应是否由标记显示，以检测所述靶核酸是否会被扩增。
2.权利要求1的方法，其中所述步骤(a)的核酸寡聚体的长度是10-40bp。
3.权利要求1的方法，其中所述步骤(a)的核酸寡聚体包含一个或多个选自SEQ ID NO:1至3的序列。
4.权利要求1的方法，其中所述步骤(b)包括将步骤(a)的扩增产物注射至所述膜的侧面，使得包含在所述扩增产物中的核酸寡聚体可与固定在所述膜上的探针互补杂交，同时所述扩增产物移动。
5.权利要求1的方法，其中与所述步骤(b)的核酸寡聚体互补结合的探针包含一个或多个选自SEQ ID NO:10至12的序列。
6.权利要求1的方法，其中所述步骤(b)的探针另外包含用于固定在所述膜上的核酸寡聚体。
7.权利要求6的方法，其中另外的核酸寡聚体包含SEQ ID NO:13的序列。
8.权利要求1的方法，其中所述标记是生物素、Cy5、Cy3、FITC、EDANS(5-(2'-氨基乙基)氨基-1-萘磺酸)、四甲基罗丹明(TMR)、四甲基罗丹明异氰酸酯(TMRITC)、x-罗丹明、DIG或抗体。
9.权利要求1的方法，其中步骤(c)进一步包括与结合剂的反应，所述结合剂引起标记的生色信号。
10.权利要求9的方法，其中所述结合剂是链霉亲和素。
11.一种用于检测靶核酸的试剂盒，其包含：
(a)引物，其包含(i)与靶核酸互补的结合区和(ii)包含与靶核酸非互补的核苷酸的核酸寡聚体，以及(iii)带有标记的引物；和
(b)膜，其具有固定于其上的与核酸寡聚体互补结合的探针。
12.权利要求11的试剂盒，其中所述核酸寡聚体的长度是10-40bp。
13.权利要求11的试剂盒，其中所述核酸寡聚体包含一个或多个选自SEQ ID NO:1至3的序列。
14.权利要求11的试剂盒，其中与所述核酸寡聚体互补结合的探针包含一个或多个选自SEQ ID NO:10至12的序列。
15.权利要求11的试剂盒，其中所述探针进一步包含用于固定在所述膜上的核酸寡聚体。
16.权利要求15的试剂盒，其中另外的核酸寡聚体包含SEQ ID NO:13的序列。
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