[发明专利]去细胞软骨移植物的制备方法与用途

说明书

本发明在此公开一种制备去细胞软骨移植物的方法。所述方法包含以下步骤：将从动物取得的软骨基质，以碱、灭菌和去细胞处理步骤进行处理后，制成去细胞软骨移植物。依据本发明方法所制备的软骨移植物可完全去除软骨基质上的细胞物质，同时仍能保留软骨基质中胶原蛋白纤维的孔隙率和完整性，因此，依据本发明方法所制备的软骨移植物适合作为异种移植物，用以供宿主细胞生长。在此亦公开一种治疗患有骨软骨疾病的个体的方法，本方法是将去细胞软骨移植物移植至该个体的病灶处。

本发明主张美国临时申请案第62/203,904号(申请日：2015年08月1日)的优先权，该申请案的完整内容纳入为本发明专利说明书以供参照。

技术领域

本发明属于去细胞软骨移植物的领域，特别涉及改善制备去细胞软骨移植物的方法，所述去细胞软骨移植物是适合作为细胞生长的生物性支架，因此，本发明去细胞软骨移植物可作为治疗骨软骨疾病的异种移植物。

背景技术

软骨组织损伤经常发生于活动量大的人身上和老年族群，通常是由急性或反复性的损伤或老化所导致的。现今治疗方案包含休息、利用微关节显微手术清除软骨损伤区域，以及利用其他手术治疗(例如，微裂术(microfracture)、钻孔术(drilling)和磨损法(abrasion))。这些治疗方案只能暂时性缓解症状，特别是当患者在经处置后，仍保持与损伤前相同的活动量时。举例而言，慢性膝关节软骨损伤可能使关节软骨的损坏更为严重，最终需置换整个膝关节。此外，骨软骨疾病或损伤仍面临其他困境，目前尚无有效的医疗程序和方法能够治疗。再者，除了上述老化、损伤和/或疾病所导致的软骨受损外，因整形或美容手术过程需修复或增加软骨组织，如，隆鼻手术、脸部左右不对称的矫正手术、眼睑周围的矫正手术和脸部整形手术等，使得整形或美容手术所需的软骨移植物需求量也在持续攀升中。

市面上的工程软骨是以接种水凝胶或天然或合成的聚合物所形成，以该些方式制成的工程软骨无法拥有与天然软骨相同的机械特性，此因天然软骨最主要的成分是胶原蛋白，其具有较高的机械强度。为了克服工程软骨机械强度不足的缺陷，在制备过程中往往透过添加交联剂(如，戊二醛)来改善水凝胶或聚合物支架的机械强度。然而，大部分的交联剂对人类具有毒性，故使用上有限制。

提供一种改良的软骨移植物，可用于矫正手术或治疗上述的损伤是有必要的。改良的软骨移植物不仅应拥有天然软骨的机械强度和构型，能有效的将软骨恢复至损伤前的状态，且不会引起其他并发症(如，免疫原性的问题)；另外，软骨移植物也要容易制造，且制备成本低廉。

发明内容

发明人制作的本发明内容以制造改善软骨移植物来克服前述提及的公知问题，特别是具有较佳的机械强度及具有天然软骨的天然构型的软骨移植物。

本发明内容的一方面是一种提供制备去细胞软骨移植物的方法，所述去细胞软骨移植物适用于整形手术(如，整鼻手术、脸部矫正手术等)，或治疗骨软骨疾病。所述方法包含以下步骤：

(1)切割一动物的软骨以产生一软骨基质；

(2)以一种碱来处理步骤(1)的软骨基质；

(3)将步骤(2)中经碱处理的软骨基质进行灭菌处理；以及

(4)去除步骤(3)中经灭菌的软骨基质的细胞，以制得该去细胞软骨移植物。

再者，依据本发明内容的实施方式，在步骤(1)中，所述软骨是取自于一哺乳动物，且所述软骨是鼻软骨、肋软骨、耳软骨或膝关节软骨。

依据本发明内容的实施方式，在步骤(2)中，该碱处理步骤包含在室温下以氢氧化钠溶液处理该软骨基质3至24小时。

依据本发明内容的实施方式，在步骤(3)中，以一灭菌剂处理该经碱处理的软骨基质，其中该灭菌剂选自于以下所组成的群组中：醇类、氧化剂、放射线、酚化合物和四级铵化合物。