[发明专利]细胞培养器

说明书

技术领域

本发明特别涉及能够大量地简便地制备微小尺寸的细胞结构体的细胞培养器。

背景技术

1900年前后开发的细胞培养技术是生物学领域重要的实验技术。开发初期，停留在致力于使培养基成分最优化等驯化细胞方面，并逐渐以单层培养、悬浮培养的技术为中心进行了研究。

近年来，已经阐明了单层培养体系的细胞与生物体内的组织的细胞之间在各种性质、刺激响应性、细胞功能等方面都不同，相比于使单层结构形成的单层培养而言，使与生物体内的组织结构相近的3D结构形成的3D培养、特别是球形培养的需求正在扩大。

已经积极地开发的经典技术有：使细胞包埋于3D凝胶中的技术，所述3D凝胶是通过使细胞悬浮在蛋白质系的溶胶中并使用任意引发因素(热、光、化学交联剂等)使该细胞悬浮液凝胶化从而形成的；使细胞植入多孔质的支持物中的技术；使用固定有NIPAM的培养皿来制备细胞片层叠体的技术等。

近年来正在开发的方法有：住友电木株式会社的Prime Surface(商品名)等的、使细胞沉降至非粘附性的圆形底面的方法；JSR公司的Nano Culture Plate(商品名)、日立制作所的Nano Pillar Plate(商品名)等的、利用激光加工将平滑面制成规则分布的凹凸面从而提高粘附于培养面的细胞的迁移性，并由此在培养面诱导细胞的自组装化的方法；可乐丽株式会社(クラレ社)的Elplasia(商品名)、岩城株式会社(イワキ社)EZSPHERE(商品名)等的、使用配设有无限个直径100～500μm、深度500μm左右的孔的培养皿，并使种植于各孔内的细胞沉降至各孔的底面的方法等。

现有技术文献

非专利文献

非专利文献1：Nature,Vol 424,P870-872,21August,2003。

发明内容

本发明要解决的课题

然而，在大量地制备具有3D结构的球形等的细胞结构体的情况下，对于上述现有的细胞培养器，必须将细胞种植在许多微小尺寸(例如，100μm×200μm)的孔(well)中，培养操作很不方便。

鉴于此，本发明的目的是提供一种能够大量且简便地制备微小尺寸(例如，几百微米(μm)以下的尺寸)的细胞结构体(例如，球形)的细胞培养器。

解决课题的方案

本发明的主要内容如下。

本发明的细胞培养器，其特征在于，在细胞培养器的培养面具有多个用温度响应性聚合物或温度响应性聚合物组合物包覆的第一包覆区域，所述第一包覆区域的表面Zeta电位(ζ电位)是0～50mV。

在此，水对本发明的细胞培养器的所述第一包覆区域的接触角优选是50～90°。

另外，在本发明的细胞培养器中，优选所述细胞培养器的培养面是细胞非粘附性的。

进一步，在本发明的细胞培养器中，优选所述第一包覆区域的俯视形状是从由圆形、椭圆形、外轮廓线的内侧具有曲率中心的形状所组成的组中选出的至少一种。

进一步，在本发明的细胞培养器中，优选所述温度响应性聚合物或温度响应性聚合物组合物是选自由以下物质组成的组中的至少一种的温度响应性聚合物或温度响应性聚合物组合物，所述物质是：包含甲基丙烯酸-2-N,N-二甲氨基乙酯(DMAEMA)单元和阴离子型单体单元的温度响应性聚合物；包含N-异丙基丙烯酰胺(NIPAM)单元和阳离子型单体单元和阴离子型单体单元的温度响应性聚合物；包含甲基丙烯酸-2-N,N-二甲氨基乙酯(DMAEMA)和/或其衍生物的聚合物、2-氨基-2-羟甲基-1,3-丙二醇(Tris)、以及从由核酸、肝素、透明质酸、硫酸葡聚糖、聚苯乙烯磺酸、聚丙烯酸、聚甲基丙烯酸、聚磷酸、硫酸多糖类、凝胶多糖及聚海藻酸以及它们的碱金属盐所组成的组中选出的一种以上的阴离子型物质的温度响应性聚合物组合物。

进一步，在本发明的细胞培养器中，优选的是，所述阴离子型单体是选自由丙烯酸、甲基丙烯酸、以及乙烯衍生物所组成的组中的至少一种，所述乙烯衍生物在侧链中具有选自由羧基、磺酸基、磷酸基所组成组中的至少一种基团。

进一步，在本发明的细胞培养器中，优选所述阳离子型单体是从由3-(N,N-二甲氨基丙基)-(甲基)丙烯酰胺、3-(N,N-二甲氨基丙基)-(甲基)丙烯酸酯、氨基苯乙烯、2-(N,N-二甲氨基乙基)-(甲基)丙烯酰胺、2-(N,N-二甲氨基乙基)-(甲基)丙烯酸酯所组成的组中选出的至少一种。