[发明专利]用于检测核酸的超高灵敏度探针

权利要求书

1.一种组合物，包含：

a)能够与具有目标序列的核酸杂交的目标探针，所述目标探针依次包含

(i)与所述目标序列互补的核酸序列；和

(ii)具有第一尾部核苷酸序列的预桥区；

b)多个第一桥探针，每个第一桥探针依次包括

(i)具有第一头部核苷酸序列的第一头部区域；

(ii)具有间隙核苷酸序列的第一间隙区域；和

(iii)具有第一尾部核苷酸序列的第一尾部区域；

c)多个第二桥探针，每个第二桥探针依次包括

(i)具有第二头部核苷酸序列的第二头部区域，所述第二头部核苷酸序列与所述第一头部核苷酸序列互补；

(ii)具有所述间隙核苷酸序列的第二间隙区域；和

(iii)具有第二尾部核苷酸序列的第二尾部区域，所述第二尾部核苷酸序列与所述第一尾部核苷酸序列互补；

d)多个标记探针，每个所述标记探针包含

(i)与间隙核苷酸序列互补的序列；和

(ii)标记，

其中至少一个第二桥探针能够通过第二尾部区域和所述目标探针结合并且通过第二头部区域和一个第一桥探针结合，其中每个第一桥探针能够通过第一头部区域和第一尾部区域分别和两个第二桥探针结合，且其中每个第一和第二桥探针能够通过第一间隙区域和第二间隙区域分别和标记探针结合。

2.权利要求1的组合物，其中所述第一头部核苷酸序列由4-20个核苷酸组成。

3.权利要求1的组合物，其中所述第一个尾部核苷酸序列由4-20个核苷酸组成。

4.权利要求1的组合物，其中所述间隙核苷酸序列由6-20个核苷酸组成。

5.权利要求1的组合物，其中所述目标探针和/或所述第一桥探针和/或所述第二桥探针和/或所述标记探针包含至少一个核苷酸类似物。

6.权利要求5的组合物，其中所述核苷酸类似物是锁核酸核苷酸。

7.权利要求1的组合物，其中所述标记是荧光基团，辣根过氧化物酶或碱性磷酸酶。

8.权利要求1的组合物，其中所述目标核酸选自以下组：DNA，cDNA，RNA，mRNA，rRNA，miRNA，Lnc RNA和siRNA。

9.权利要求1的组合物，其中所述目标探针还包含具有所述间隙核苷酸序列的标记区域。

10.权利要求1的组合物，还包含能够与所述目标核酸杂交的捕获探针，所述捕获探针包含磁珠或生物素。

11.权利要求1的组合物，其中所述第一桥探针与所述第二桥探针相同。

12.一种组合物，包含：

a)能够与具有目标序列的单链核酸杂交的目标探针，所述目标探针依次包含

(i)与所述目标序列互补的核酸序列；和

(ii)具有尾部回文序列的预桥区；

b)多个桥探针，其中每个所述桥探针依次包括

(i)具有头部回文序列的第一区域；

(ii)具有间隙序列的第二区域；

(iii)具有尾部回文序列的第三区域；和

c)多个标记探针，每个所述标记探针包含

(i)与间隙序列互补的序列，和

(ii)标记，

其中多个桥探针中包括第一桥探针，所述第一桥探针能够通过第三区域和目标探针的预桥区结合并且通过第一区域和第二桥探针的第一区域结合，所述第二桥探针能够通过第三区域和第三桥探针的第三区域结合，并且其中每个桥探针能够通过第二区域和标记探针结合。